Animal Tissue Direct PCR kit-UNG (walay Sampling Tools) Protocol
Mga paghulagway
Kini nga kit naggamit sa usa ka talagsaon nga lysis buffer system aron dali nga buhian ang genomic DNA gikan sa mga sample sa tisyu sa hayop alang sa mga reaksyon sa PCR, busa kini labi nga angay alang sa dinagkong genetic nga pagsulay.
Ang proseso sa pagpagawas sa genomic DNA gikan sa lysis buffer nahuman sulod sa 10-30 minutos sa 65°C.Wala nay laing proseso sama sa pagtangtang sa protina ug RNA ang gikinahanglan, ug ang gipagawas nga trace DNA mahimong gamiton isip template sa PCR reaction.
2×PCR SayonTMAng Mix (UNG) naggamit sa dUTP imbes sa dTTP base sa 2×PCR EasyTMPagsagol, ug idugang ang UNG nga enzyme (Uracil-N-glycosylase) nga makadaut sa template nga adunay dUTP sa parehas nga oras.Sa wala pa ang reaksyon sa PCR, ang UNG enzyme gigamit sa pagpaubos sa produkto sa PCR nga adunay uracil.Ang enzyme sa UNG wala’y epekto sa template nga wala’y uracil, sa ingon nagsiguro sa pagkasigurado ug katukma sa pagpadako ug pagpugong sa posibilidad sa kontaminasyon sa mga produkto sa PCR sa panahon sa dinagkong genetic nga pagsulay.
Ang D-Taq DNA polymerase usa ka DNA polymerase nga espesyal nga gihimo sa Foregene alang sa direkta nga mga reaksyon sa PCR.Ang D-Taq DNA polymerase adunay lig-on nga pagkamatugtanon sa lainlaing PCR reaction inhibitors, ug epektibong makapadako sa pagsubay sa gidaghanon sa DNA sa nagkalain-laing komplikadong sistema sa reaksyon, ug ang katulin sa pagpadako mahimong moabot sa 2Kb/min, nga ilabinang angay alang sa Direct PCR reaction.
Mga sangkap sa kit
Bahin I | Buffer AL |
Foregene nga Protease | |
6 × DNA Loading Buffer | |
Bahin II | 2×PCR SayonTMMix(UNG) |
Mga bahin ug bentaha
■Walay makagugol sa panahon ug mahal nga DNA purification
■ Ang sampol nga panginahanglan gamay ra, ingon ka gamay sa 5mg nga tisyu sa hayop mahimong masulayan.
■ Walay espesyal nga pagtambal sama sa paggaling ug pagdugmok gikinahanglan, ug ang operasyon mao ang yano.
■ Optimized PCR system naghimo sa PCR nga adunay mas taas nga espesipiko ug mas lig-on nga pagtugot sa PCR reaction inhibitors.
■ Anti-polusyon nga PCR system 2×Sayon sa PCRTMAng Mix (UNG) epektibo nga nagwagtang sa polusyon nga gipahinabo sa mga produkto sa PCR ug nagsiguro sa pagkatino ug katukma sa pagpadako.
Mga parameter sa kit
Aplikasyon: lainlaing mga tisyu sa hayop.
Ang DNA nga gipagawas gikan sa sample lysis: gigamit lamang isip usa ka template sa PCR.
Ang kit mahimong gamiton alang sa mosunod nga mga katuyoan: pag-ila sa transgenosis, genotyping sa mananap, ug uban pa.
Daloy sa trabaho
Pagtipig ug kinabuhi sa estante
Ang Part I niini nga kit kinahanglan nga tipigan sa 2-8℃.
Ang reagent Buffer AL mahimong tipigan sulod sa 12 ka bulan ubos sa uga nga kondisyon;kini mahimong tipigan sa 2-8℃para sa mas taas nga storage.
Ang Reagent Foregene Protease adunay talagsaon nga pormula.Aron masiguro ang kalihokan ug kalig-on niini, palihug ibutang kini sa 4℃sulod sa 12 ka bulan.
Reagent 6×Ang DNA Loading Buffer mahimong tipigan sa 4℃o -20℃sa dugay nga panahon.
Ang Part II niini nga kit kinahanglan nga tipigan sa -20℃.
Reagent 2×Sayon sa PCRTMMix (UNG), kung kini gigamit kanunay, mahimo usab kini tipigan sa 4℃alang sa hamubo nga pagtipig (gamiton sulod sa 10 ka adlaw).