Pasiuna:

Ang RNA, siyentipikong ngalan nga ribonucleic acid, ang abbreviation niini gikan sa RiboNucleic Acid, usa ka matang sa nucleic acid nga naporma pinaagi sa pagkonektar sa labing menos dose ka ribonucleotides pinaagi sa phosphodiester bonds.

Ang premyo sa pagsuhid sa RNA mao ang pagkuha sa walay polusyon nga Total RNA, ug ang sukaranang prinsipyo sa RNA extraction mahimong halos i-summarize sama sa mosunod:

1. Gub-on una ang mga selula

2. Dayon kuhaa ang mga macromolecular impurities (protina, lipid, DNA, ug uban pa)

3. Sa kataposan, ang RNA na-precipitate samtang nagtangtang sa mga asin ug mga organikong solvent, ug dugang nga pagputli sa RNA

Kaniadto ug karon sa pamaagi sa pagkuha

Ang unang henerasyon sa RNA extraction method mao ang TRIzol precipitation method (reagents nga gigamit naglakip sa guanidine isothiocyanate, phenol, chloroform, ug uban pa) nga giimbento sa usa ka apohan nga ginganlag Piotr Chomczynski ug lola Nicoletta Sacchi, tungod kay kini nga imbensyon nagtugot sa RNA extraction nga panukiduki nga Dali ug sayon, sukad niadto nagsugod ang pagsaka sa RNA.

Sa ulahi, gibaligya ni Lolo kini nga patente ngadto sa Invitrogen, ug ang Invitrogen nagpasiugda niini nga paagi sa tibuok kalibotan ug nahimong kaylap nga gigamit nga paagi.

Sa ulahi, ang Invitrogen nakuha sa Thermo!

Representante nga produkto: Invitrogen's TRIzol reagent

Bisan pa, ang pamaagi sa pag-ulan sa TRIzol nanginahanglan daghang pag-ulan ug pagkuha sa RNA, ug ang mga reagents nga gigamit makahilo ug dugay nga magamit.

Busa, ang ikaduhang henerasyon nga kolum-enzyme nga pamaagi sa pagputli nahimo, gamit ang silica gel membrane isip usa ka piho nga nucleic acid adsorption nga materyal aron mapadako ang pagkaayo sa RNA sa sample samtang nagtangtang sa ubang mga hugaw.

Ang ikaduha nga henerasyon nga pamaagi gipasimple ang operasyon base sa lig-on nga pasundayag, gipamenos ang risgo nga hinungdan, ug gipauswag ang kaepektibo sa pagkuha sa RNA.

Representante nga mga produkto: QIAGEN RNeasy ug kadaghanan sa mga domestic nga produkto

Bisan pa, ang una ug ikaduha nga henerasyon nga mga pamaagi nanginahanglan paggamit sa DNase aron makuha ang kontaminasyon sa DNA, nga nagdala sa pipila ka kahasol sa mga nagsunod nga mga eksperimento sa ubos.Ang nahabilin nga DNase makapakunhod sa kahusayan sa reverse transcription ug makunhuran ang first-strand cDNA synthesis, sa ingon makaapekto sa katukma sa mga resulta.

Busa, ang ikatulong henerasyon nga pamaagi sa pagkuha gi-optimize base sa ikaduhang henerasyon.Ang eksperimento dili kinahanglan nga magdugang bisan unsang mga enzyme, ug ang RNA dali nga makuha sa duha ra nga mga kolum.

Column 1: DNA-Cleaning Column aron malimpyohan ang DNA

Column 2: RNA-only Column espesipikong nag-adsorb ug nag-recover sa RNA

Ang ingon nga yano nga operasyon dili lamang makatipig oras, apan gipadali usab ang operasyon sa mga eksperimento sa ubos!

Representante nga mga produkto: QIAGEN RNeasy Plus ugForegeneRNA purification serye nga mga produkto

(RNeasy Plus)

(ni ForegeneTanum Total RNA Isolation Kit）

Sultihan ka sa hilom!Ang RNA kit sa Foregene nagpresentar usab sa usa ka labi ka dali nga magamit nga RNase Eraser, nga hingpit nga makatangtang sa 400μg sa RNase sa solid nga nawong sa 1 minuto, nga wala’y pagdugang bisan unsang makahilo nga mga butang sa lawas sa tawo!

Pic1: tsart sa pagtandi sa proseso sa operasyon

Ang mga produkto sa Foregene makakompleto sa RNA extraction sa duha lang ka kanta, ayaw himoa ang uban nga masina sa imong pag-uswag sa eksperimento!

Pic2:Emga resulta sa eksperimental tsart sa pagtandi

Ang unang henerasyon (1: TRIzol)

Ang ikaduhang henerasyon (2: RNeasy sa QIAGEN)

Ang ikatulo nga henerasyon (3: QIAGEN's RNeasy plus, 4: Foregene)

Pic3: qPCR graph (amplification curve graph)

Ang unang henerasyon (berde nagpasabot TRIzol -, pula nagpasabot TRIzol +)

Ang ikaduhang henerasyon (ang asul nga langit nagpasabut nga QIAGEN RNeasy-, ang pula nagpasabut nga QIAGEN RNeasy +)

Ang ikatulo nga henerasyon (asul nagpasabot QIAGEN RNeasy plus, berde nagpasabot Foregene)

(Note: qPCR graph “-” nagpaila nga ang DNase wala madugang ug ang DNA kontaminasyon wala matangtang. Busa, ang CT mas taas ug ang resulta dili tukma; “+” nagpakita nga ang DNase gidugang ug ang DNA kontaminasyon gikuha na, ang resulta tukma)

Ang matag teknikal nga pag-upgrade nagpasabut nga ang operasyon sa eksperimento nag-uswag sa usa ka labi ka yano ug labi ka user-friendly nga direksyon.

Ang Foregene nagtumong sa pagtabang sa mas daghang siyentipikong tigdukiduki nga makadaginot sa panahon ug gasto sa eksperimento, makakuha ug taas nga kalidad nga mga resulta sa eksperimento, ug dungan nga makamugna ug mas bililhong mga kalamposan sa panukiduki sa siyensya.