Gigamit pa ba nimo ang Trizol aron makuha ang RNA?
Sus, ayaw kog kabalaka sa imong panglawas!
Hapit na ma-marginalize si Trizol, don't tell me naa ka pa sa kangitngit?

Ang panguna nga sangkap sa Trizol reagent mao ang phenol, ug ang mga organikong reagents sama sa chloroform gidugang usab sa eksperimento nga operasyon.Ang dugay nga pagkaladlad makadaot sa imong kahimsog, labi na ang direkta nga pagkontak sa panit mahimong hinungdan sa grabe nga pagkasunog sa kemikal ug permanenteng mga samad.

Ubos sa normal nga mga kahimtang, ang mga kauban sa laboratoryo makapakunhod lamang sa mga kapeligrohan pinaagi sa hingpit nga pag-armas sa ilang mga kaugalingon (pagsul-ob og lab coat, gwantes ug maskara).

Ug ang akong tambag kanimo mao: palihug ilisan ang Trizol direkta aron malikayan ang kadaot gikan sa gigikanan.

1. Ang unang henerasyon nga produkto sa RNA extraction
Migawas sa 1987 (Trizol reagents)

bentaha:
Mas kompleto nga pagkuha

Mga disbentaha:
Ang mga makahilo nga reagents sama sa guanidine isothiocyanate-phenol-chloroform gikinahanglan;
Kusog nga operasyon;
Kinahanglan nga gamiton ang DNase aron makuha ang kontaminasyon sa DNA

2.Ang ikaduhang henerasyon nga produkto sa RNA extraction
Mogawas sa 1994 (QIAGEN RNeasy ug kadaghanan sa mga domestic nga produkto)

bentaha:
Ang kolum nga centrifugal nga pamaagi gisagop, nga sayon ​​nga operahan;

Disbentaha:
Kinahanglan nga mag-centrifuge aron makuha ang mga tinumpag sa tisyu
Kinahanglan nga gamiton ang DNase aron makuha ang kontaminasyon sa DNA

3.Ang ikatulo nga henerasyon nga produkto sa RNA extraction
Mogawas sa 2005 (QIAGEN RNeasy Plus ug ForegeneRNA purification series nga mga produkto)

bentaha:
Direkta nga gamiton ang DNA removal column aron makuha ang DNA ug tissue debris sa samang higayon, makadaginot sa oras ug paningkamot;
Luwas ug kombenyente, dili kinahanglan nga idugang ang kolum sa filter ug DNase aron dali nga makuha ang mga hugaw ug malikayan ang kontaminasyon sa DNA

Atong tan-awon ang mga kalainan sa operasyon tali sa una nga henerasyon nga produkto (Trizol), ang ikaduha nga henerasyon nga produkto (RNeasy) ug ang ikatulo nga henerasyon nga produkto (Foregene) sa RNA extraction:

Ang operasyon sa numero klaro: ang ikatulo nga henerasyon nga produkto adunay klaro nga mga bentaha

Tulo lang ka pulong nga ihulagway: sayon!Paspas!Kaluwasan

Ang tsart sa PK sa mga resulta sa eksperimentokayang una nga henerasyon, ikaduha nga henerasyon ug ikatulo nga henerasyon nga mga produkto sa pagkuha sa RNA:

1. Electrophoretogram

Ang unang henerasyon (1: Trizol)
Ang ikaduhang henerasyon (2:QIAGEN RNeasy)
Ang ikatulong henerasyon (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)

Unsang matanga sa produkto ang maayo, mahibal-an nimo pinaagi sa pagtandi
Nakuha ang RNA gamit ang Foregene kit
Dili lamang taas nga konsentrasyon apan maayo usab nga integridad

2.qPCR graph (amplification curve graph)

Ang unang henerasyon (Trizol)

Ang ikaduhang henerasyon (asul nga langitnagpasabotQIAGEN RNeasy-, pulanagpasabotQIAGEN RNeasy +)

Ang ikatulo nga henerasyon (asul nagpasabot Foregene, berde nagpasabot QIAGEN RNeasy plus)

(Pahinumdom: Ang ikaduhang henerasyon nga QIAGEN RNeasy sa qPCR graph nagpasabot nga ang kit dili makadugang sa DNase ug dili makatangtang sa kontaminasyon sa DNA. Busa, ang CT mas taas ug ang resulta dili tukma; QIAGEN RNeasy + nagpasabot nga ang DNase gidugang ug ang DNA kontaminasyon gikuha na, ug ang resulta tukma)

Kung kini usa ka electrophoregram o usa ka quantitative PCR amplification curve graph, ang kalidad sa mga produkto sa Foregene dili ubos sa mga langyaw nga imported nga produkto.