Nagtuo ako nga ang tanan kanunay nga makasugat sa ingon o ingon nga mga problema kung maghimo mga reaksyon sa PCR, apan kadaghanan niini mahimong maklasipikar sa duha nga panguna nga mga problema:

Gamay ra kaayo nga pagpadako sa template sa gene (pagpadako);
Sobra nga dili target nga gene amplification.
Ang paggamit sa mga additives usa sa kasagaran nga mga estratehiya aron masulbad kini nga mga problema.Kasagaran ang papel sa mga additives adunay duha ka aspeto:
ikaduha nga istrukturasa mga gene (secondary structure);
Bawasan ang dili piho nga priming.
Karon, ang editor sa mubo nga pagpaila kanimo sa kasagaran nga mga additives sa mga reaksyon sa PCR ug ang ilang mga gimbuhaton.
Mga additives nga nagpamenos sa sekondaryang istruktura
sulfoxide(DMSO)
mga sample sa genenga adunay taas nga sulud sa GC.Bisan pa, ang DMSO dako usab nga pagkunhod sa kalihokan sa Taq polymerase.Busa, ang matag usa kinahanglan nga balansehon ang template accessibility ug ang kalihokan sa polymerase.Gisugyot sa editor nga mahimo nimong sulayan ang lainlaing mga konsentrasyon sa DSMO, sama sa gikan sa 2% hangtod 10%, aron makit-an ang konsentrasyon nga nahiangay sa imong eksperimento.
Non-ionic nga mga detergent
Ang mga non-ionic nga detergent, sama sa 0.1-1% Triton X-100, Tween 20 o NP-40, kasagarang makapakunhod sa ikaduhang istruktura sa DNA.Bisan kung kini makadugang sa pagpadako sa template nga gene, mahimo usab kini nga hinungdan sa kasamok sa dili piho nga pagpadako.Busa, kini nga mga additives maayo alang sa ubos nga ani nga mga reaksyon sa PCR nga walay mga tinumpag, apan dili kaayo maayo alang sa medyo dili putli nga mga reaksyon sa PRC.Ang laing kaayohan sa non-ionic detergent mao ang pagkunhod sa kontaminasyon sa SDS.Kasagaran sa panahon sa proseso sa pagkuha sa DNA, ang SDS dad-on sa PCR nga lakang, nga makapugong sa kalihokan sa polymerase.Busa, ang pagdugang sa 0.5% Tween-20 o Tween-40 sa reaksyon mahimong neutralize sa negatibo nga mga epekto sa SDS.
Betaine_
Ang Betaine makapauswag sa DNA amplification pinaagi sa pagkunhod sa secondary structure formation ug sa kasagaran usa ka "misteryo" nga dugang sa commercial PCR kits.Kung gusto nimo gamiton ang betaine, kinahanglan nimo ibutang ang betaine o betaine mono-hydrate (Betaine o Betaine mono-hydrate), apan dili betaine hydrochloride (Betaine HCl), i-adjust sa katapusang konsentrasyon nga 1-1.7M.Makatabang usab ang Betaine sa pagpauswag sa espesipiko tungod kay gitangtang niini ang pagsalig sa komposisyon sa base nga parisan sa pagtunaw sa DNA / denaturation sa DNA.
Mga additives aron makunhuran ang dili piho nga priming
Formamide
Ang Formamide usa ka sagad nga gigamit nga organikong PCR additive.Mahimo kini nga maghiusa sa mayor nga groove ug minor groove sa DNA, sa ingon makunhuran ang kalig-on sa master DNA double helix ug ipaubos ang temperatura sa pagkatunaw sa DNA.Ang konsentrasyon sa formamide nga gigamit sa mga eksperimento sa PCR kasagaran 1% -5%.
Tetramethylammonium chloride( TMAC)
Ang Tetramethylammonium chloride makadugang sa espesipiko sa hybridization (hybridization specificity) ug makapataas sa temperatura sa pagkatunaw sa DNA.Sa ingon, ang TMAC makatangtang sa dili piho nga priming ug makunhuran ang misbinding sa DNA ug RNA.Kung imong gamitondegenerate nga mga primersa reaksyon sa PCR, hinumdomi nga idugang ang TMAC, nga sagad gigamit sa konsentrasyon nga 15-100mM.
Ubang Komon nga mga Additives
Gawas pa sa duha ka mga kategorya sa mga additives nga gihisgutan sa ibabaw, adunay daghang mga sagad nga additives sa mga reaksyon sa PCR, bisan kung kini adunay lainlaing mga gimbuhaton, hinungdanon usab kini.
Magnesium ion
Ang Magnesium ion usa ka kinahanglanon nga cofactor (cofactor) sa polymerase, sa ato pa, kung wala ang magnesium ion, ang polymerase dili aktibo.Bisan pa, ang sobra nga mga ion sa magnesium mahimo usab nga makaapekto sa kaepektibo sa polymerase.Ang konsentrasyon sa magnesium ion sa matag reaksyon sa PCR managlahi.Ang mga ahente sa chelating (sama sa EDTA o citrate), ang konsentrasyon sa mga dNTP ug mga protina tanan makaapekto sa konsentrasyon sa mga magnesium ion.Mao nga, kung adunay mga problema sa imong eksperimento sa PCR, mahimo nimong sulayan ang pagbag-o sa lainlaing mga konsentrasyon sa magnesium ion, pananglitan, gikan sa 1.0 hangtod 4.0mM, nga adunay interval nga 0.5-1mM sa taliwala.
Angay nga hinumdoman nga daghang mga siklo sa pag-freeze-thaw mahimong mosangput sa stratification sa konsentrasyon sa solusyon sa magnesium chloride.Busa, kinahanglan nimo nga matunaw kini sa hingpit sa dili pa gamiton, ug isagol kini og maayo sa dili pa gamiton.
Bovine serum albumin(Bovine albumin, BSA)
Sa mga eksperimento sa molecular chemistry, ang bovine serum albumin kay komon kaayo nga additive, ilabina sa restriction enzyme digestion ug PCR experiments.Sa mga reaksiyon sa PCR, ang BSA makatabang sa pagpakunhod sa mga kontaminante sama sa mga phenolic compound.Ug matod pa nga makapamenos kini sa pagdikit sa mga reactant sa bungbong sa test tube.Sa reaksyon sa PCR, kasagaran ang konsentrasyon sa BSA nga gidugang mahimong moabot sa 0.8 mg/ml.
 
May Kalabutan nga mga Produkto:
Bayani sa PCR(uban ang tina)
Bayani sa PCR