Ang mosunod nga pagtuki sa posibleng mga problema saBuccalswab/FTA card DNA extraction is helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali:Tech@foregene.com.

Ang kolum sa pagputli nabara

Sa kini nga kit, sa genomic DNA extraction operation, ang purification column direkta nga adsorbed sa sample nga enzymatic lysis mixture nga walay centrifugation step, ug ang purification column mahimong ma-block tungod sa dili kompleto nga enzymization ug taas nga viscosity sa sample.

Ang mosunod nga posible nga mga hinungdan mao ang mosunod:

1. Dili kompleto nga enzymatic digestion sa mga sample sa tisyu.

Rekomendasyon: Ang sample nga oras sa pagproseso sa Foregene Protease mahimong tukma nga mapalawig o ang supernatant mahimong makuha pagkahuman sa centrifugation sa 12,000 rpm (~13,400× g) sulod sa 5 min.

2. Sobra nga paggamit sa mga sample sa tisyu o dagkong mga tisyu.

Rekomendasyon: Labing maayo nga dili molapas sa 1Buccal swab sa sample;kung ang sample dako kaayo, dugangi ang dosis sa Buffer ST1, Foregene Protease, buffer ST2 sumala niana.

3. Taas ra kaayo ang sample viscosity.

Rekomendasyon: Ang mga sample mahimong haom nga lasaw sa 10 mM nga Tris-HCl sa dili pa makuha ang genomic DNA.

4. Ang mga tipik sa blood card gisuyop.

Rekomendasyon: Ang lumalabay nga centrifugation time sa step 6 sa blood spot (FTA Card) genomic extraction mahimong tukma nga mapalawig.

Ubos nga ani o walay DNA

Kanunay adunay lainlaing mga hinungdan nga makaapekto sa genomic DNA yield, lakip ang gigikanan sa sample, kondisyon sa pagtipig sa sample, pag-andam sa sample, pagmaniobra, ug uban pa.

Ang genomic DNA dili makuha sa panahon sa pagkuha

Ang posibleng mga hinungdan mao ang mosunod:

1. Ang dili husto nga pagpreserbar sa mga sample o pagtipig sa dugay nga panahon mosangpot sa pagkadaot sa genomic DNA.

Rekomendasyon: Ang mga oral swab kinahanglan nga bag-o lang ma-sample, ug dili maayo nga gamiton ang gipreserbar nga swab para sa genomic DNA extraction operations;Ang mga sample sa dugo kinahanglan nga masiguro nga ang kalidad kuwalipikado ug ang oras sa pagtipig kinahanglan dili kaayo taas.

2. Ang gamay ra kaayo nga paggamit sa tissue mahimong moresulta sa walay pagkuha sa katugbang nga genomic DNA.

Rekomendasyon: Sunda angbuccal swab sampling nga mga instruksyon sa giya sa operasyon, ug pagpahid sa daghang mga higayon kutob sa mahimo aron igo nga mga selula ang makatapot sa oral swab alang sa genomic DNA extraction;para sa blood spot sample extraction, ang blood spot cutting area mahimong tukma nga madugangan.

3. Ang Foregene Protease dili husto nga gipreserbar, nga miresulta sa pagkunhod sa kalihokan niini o dili aktibo.

Rekomendasyon: Kumpirma ang mga kondisyon sa pagtipig saang Foregene Protease o pulihan kini og bag-ong Foregene Protease para sa enzymatic reaction.

4. Ang dili husto nga pagpreserbar sa kit o oras sa pagtipig taas kaayo, nga moresulta sa pagkapakyas sa pipila ka mga sangkap sa kit.

Rekomendasyon: Pagpalit ug bag-oBuccal swab DNApaglain kit alang sa may kalabutan nga mga pamaagi.

5. Ang Buffer WB wala magdugang ug hingpit nga ethanol.

Rekomendasyon: Kumpirma nga ang buffer WB nagdugang sa husto nga gidaghanon sa hingpit nga ethanol.

6. Ang eluent dili husto nga gidugang sa silicone film.

Rekomendasyon: Idugang ang 65°CAng pre-warmed eluent nahulog sa tunga-tunga sa silicone membrane ug ibilin sa temperatura sa lawak sulod sa 5 min aron madugangan ang kahusayan sa elution.

Low-yield genomic DNA nahimulag

Ang mosunod nga posible nga mga hinungdan mao ang mosunod:

1. Ang dili husto nga pagpreserbar sa mga sample o pagtipig sa dugay nga panahon mosangpot sa pagkadaot sa genomic DNA.

Rekomendasyon: Ang mga oral swab mas maayo nga bag-ong sample, ug ang gipreserbar nga swab kinahanglan dili gamiton alang sa genomic DNA extraction.

2. Kung ang gidaghanon sa sample sa tisyu gamay ra, ang makuha nga genomic DNA nga sulud mas gamay.

Rekomendasyon: Sunda ang oral swab sampling nga mga instruksyon sa operating guide, pagpahid sa makadaghang higayon kutob sa mahimo aron igo nga mga selula ang madugtong sa oral swab para sa genomic DNA extraction.

3. Ang Foregene Protease dili husto nga gipreserbar, nga miresulta sa pagkunhod sa kalihokan niini o dili aktibo.

Rekomendasyon: Kumpirma ang mga kondisyon sa pagtipig sathe Foregene Protease o pulihan kini og bag-o Foregene Protease alang sa enzymatic nga reaksyon.

4. Maayo nga mga problema.

Rekomendasyon: Gamita ang Buffer EB para sa elution;kung naggamit ug ddH₂O o uban pang eluent, kumpirmahi nga ang pH sa eluate anaa sa taliwala sa 7.0-8.5.

5. Ang eluate dili husto nga gidugang dropwise.

Rekomendasyon: Idugang ang eluent drops sa tunga sa silicone membrane ug biyai sa temperatura sa lawak sulod sa 5 min aron madugangan ang elution efficiency.

6. Gamay ra kaayo ang natipon nga likido sa elution.

Rekomendasyon: Gamita ang eluent para sa genomic DNA elution ingon nga gikinahanglan sa mga instruksyon, labing menoswalay kubos kay sa 15μl.

Law kaputli of genomic nga DNAnahimulag

Ang ubos nga kaputli sa genomic DNA mahimong mosangpot sa kapakyasan o dili maayo nga mga resulta sa mga eksperimento sa ubos, sama sa: ang mga enzyme dili maputol, ang PCR dili makakuha sa gene nga tipik sa interes, ug uban pa.

Ang posibleng mga hinungdan mao ang mosunod:

1. Heteroprotein polusyon, RNA polusyon.

Pagtuki: Ang kolum sa pagputli wala gihugasan gamit ang Buffer PW;ang buffer PW wash purification column wala gihugasan gamit ang saktong centrifugal speed.

Rekomendasyon: Siguroha nga walay ulan sa supernatant sa dili pa idugang ang ethanol;siguroha nga hugasan ang kolum sa pagputli sumala sa mga instruksyon, ug kini nga lakang dili mahimong laktawan.

2. Impurity ion polusyon.

Pagtuki: Ang buffer WB wash purification column wala iapil o gihugasan kausa lang, nga miresulta sa nahabilin nga kontaminasyon sa ionic.

Rekomendasyon: Siguruha nga hugasan ang Buffer WB 2 ka beses nga gimando aron makuha ang nahabilin nga mga ion kutob sa mahimo.

3. Kontaminasyon sa RNA enzyme.

Pagtuki: Ang mga langyaw nga RNases gidugang sa buffer;Ang operasyon sa paghugas sa Buffer PW dili sakto, nga miresulta sa mga residu sa RNase, nga nakaapekto sa downstream nga RNA experimental operations, sama sa in vitro transcription.

Rekomendasyon: Foregene series nucleic acidisolaAng tion kits makatangtang sa RNA nga walay dugang nga RNase,sa ingon buccal Swab/FTA Card DNA Isolation Kitgikinahanglan't pagdugang RNase;siguroha nga sundon ang mga instruksyon para sa buffer PW washing purification column, ug kini nga lakang dili mahimong laktawan.

4. Salin sa ethanol.

Pag-analisa: Ang Buffer WB wala maghimo nga walay sulod nga tube centrifugation human sa paghugas sa kolum sa pagputli.

Rekomendasyon: Buhata ang husto nga walay sulod nga tube centrifugation nga operasyon sumala sa mga instruksyon.

5. Ubang kahugaw nga polusyon.

Pag-analisa: Ang mga na-save nga sample o espesyal nga mga sample dili pretreated.

Rekomendasyon: I-pretreat pag-ayo ang sample ingon sa gisugo.