Paghimo ug PCR experiment SOP aron ma-standardize ang pamatasan sa mga personahe sa eksperimento.
Ang eksperimento higpit nga nagsunod sa mga pamaagi sa pag-opera, ug gipamubu ang polusyon sa PCR nga mahimo’g tungod sa mga hinungdan sa tawo o makapugong sa pagtungha sa polusyon.Dugang pa, ang eksperimento kinahanglan adunay katugbang nga propesyonal nga kahibalo ug kahanas, lakip ang kahanas sa pag-operate nga may kalabotan nga kagamitan, pagpatin-aw sa tibuuk nga proseso sa trabaho, pag-master sa mga pamaagi sa pagtambal sa kontaminasyon ug mga pamaagi sa pagkontrol sa kalidad sa laboratoryo, ug makahimo sa husto nga paghubad sa mga resulta sa pagsulay.
Pagtukod ug standard nga PCR laboratory.
Ang laboratoryo sa PCR gibahin sa upat ka mga lugar sa prinsipyo, nga mao ang reagent preparation area, sample processing area, amplification area, ug amplification product analysis area.Ang una nga duha ka mga lugar mao ang mga lugar nga pre-amplification, ug ang katapusan nga duha ka mga lugar mao ang mga post-amplification nga mga lugar.Ang pre-amplification zone ug ang post-amplification zone kinahanglan nga hugot nga ibulag.Ang mga eksperimento nga materyales, reagents, papel sa pagrekord, mga bolpen, mga materyales sa pagpanglimpyo, ug uban pa, mahimo lamang nga modagayday gikan sa pre-amplification area ngadto sa post-amplification area, nga mao, gikan sa reagent preparation area → sample processing area → amplification area → amplification product analysis area, ug kinahanglan nga dili modagayday pabalik .Ang airflow sa laboratoryo kinahanglan usab nga modagayday gikan sa pre-amplification area ngadto sa post-amplification area, ug dili moagos paatras.Ang sulundon nga disenyo sa laboratoryo sa PCR gipakita sa ubos:
Figure A: Maayo nga PCR laboratory setup mode nga adunay negatibo nga presyur sa buffer room
Figure B: Maayo nga PCR laboratory setup mode nga adunay positibo nga presyur sa buffer room
Ang mga diagram sa pag-setup sa laboratoryo sa PCR nga gihatag sa Figure A ug Figure B kinahanglan nga usa ka mas maayo nga setup mode, ug ang laboratoryo nga adunay mga kondisyon mahimong magtumong niini nga mode para sa disenyo.Para sa ordinaryo nga mga laboratoryo, girekomenda nga ang PCR amplification area ug ang product analysis area mahimong mabulag, ug ang pag-abli sa tabon kinahanglan nga pagkunhod kutob sa mahimo sa sample nga lugar sa pag-andam ug ang PCR amplification area.Hinumdumi: Ang mga produkto ug mga eksperimento nga suplay sa lugar sa pag-analisa sa produkto hugot nga gidili nga dad-on sa lugar sa pag-andam sa sample ug lugar sa pagpadako sa PCR.
Kung ang laboratoryo naghimo lamang sa PCR detection ug pag-ila, kini girekomendar sa paggamit sa fluorescent quantitative PCR imbes sa conventional PCR.
Ang fluorescence quantitative PCR detection nga mga resulta mahimong kolektahon ug analisahon pinaagi sa fluorescence signal, mao nga dili na kinahanglan nga ablihan ang tabon alang sa electrophoresis human sa reaksyon, nga maglikay sa kontaminasyon sa produkto sa PCR tungod sa pagtulo sa mga produkto sa reaksyon aron maporma ang mga aerosol.Kung imong dugangan ang gidaghanon sa mga pag-abli sa takup sa panahon sa pagkarga nga lakang sa gel electrophoresis, ang kontaminasyon sa aerosol lagmit nga mahitabo.Girekomenda nga ipasiugda ang paggamit sa quantitative PCR ug anam-anam nga ilisan ang qualitative PCR.
Ang UNG anti-PCR product contamination system gigamit para sa PCR reaction.
Ang sistema naggamit sa dUTP imbes sa dTTP.Pagkahuman sa reaksyon sa PCR, ang tanan nga mga produkto sa PCR (mga tipik sa DNA) gilakip sa dUTP;sa sunod nga hugna sa reaksyon sa PCR, ang UNG enzyme nga idugang sa sistema gilumlom sa 37°C sulod sa 5 minutos sa dili pa ang PCR, nga espesipikong makadaut sa tanang mga tipik sa DNA nga adunay dUTP, ug dayon mohimo sa PCR reaction.Kini hingpit nga makatangtang sa kontaminasyon sa aerosol tungod sa mga produkto sa PCR.Ang epekto gipakita sa hulagway sa ubos:
Mubo nga sulat: Alang sa direktang serye sa PCR, mahimo nimong pilion ang serye nga mga produkto sa anti-PCR nga sistema sa kontaminasyon sa produkto sa ForegeneIsugyot
Para sa mga laboratoryo nga nagpahigayon ug dinagkong genotyping testing, kusganong girekomendar nga gamiton ang UNG anti-PCR product contamination system para sa testing reagents dugang pa sa pagtukod ug makatarunganong mga laboratoryo.
Pahinumdom: Ang paggamit niini nga sistema dili makatangtang sa kontaminasyon sa produkto sa PCR nga nahimo na.Busa, ang sistema sa UNG kinahanglan gamiton sa sinugdanan sa may kalabutan nga pagsulay, ug ang sistema sa UNG kinahanglan nga gamiton alang sa pagpadako sa PCR, aron mapugngan ang kontaminasyon sa mga produkto sa PCR False positive.
Girekomenda nga gamiton ang Direct PCR-UNG nga sistema sa Foregene kung nagpahigayon sa dinagkong pagsulay, sama sa:
Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG；
Tanum nga Binhi Direktang PCR Kit-UNG；
Animal Tissue Direct PCR Kit-UNG；
Mouse Tail Direct PCR Kit-UNG；
Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.
Kini nga serye sa mga kit gikan sa Foregenedili lamang makahimo sa PCR detection sa madali ug sa usa ka dako nga sukdanan, apan usab epektibo nga pagpugong ug pagkontrolar sa PCR kontaminasyon sa produkto.
Oras sa pag-post: Mar-19-2021
