Unsa ka daghan ang imong nahibal-an

Mahitungod ni Npagkuha sa ucleic acid

Ang sinugdanan ug katapusan sa purified nucleic acid

Ang tanan lisud sa sinugdanan, ang giputli nga nucleic acid mao ang labing

Pagsugod sa mga eksperimento sa molekula, alang sa sunod nga mga eksperimento

Ang kalampusan o kapakyasan adunay hinungdanon nga epekto.

Ang pagsubay/ultra-trace UV spectrophotometer gipaboran sa daghang siyentipikong tigdukiduki tungod kay kini makamatikod sa konsentrasyon sa nucleic acid ug protina ug salt ion residues sa yano, dali ug ekonomikanhon.

Sama sa nahibal-an namong tanan, ang A260 nagpasabot sa nucleic acid absorbance OD value, A280 nagpasabot sa protein concentration absorbance OD value, A230 nagpasabot sa salt ion concentration absorbance OD value, mao nga ang A260 makahimo sa pag-convert sa nucleic acid concentration, A260/280 nagpasabot sa protein residue, A260/230 nagpasabot sa salt ion residue, apan kini usa ka dako nga gidaghanon sa mga resulta sa pagdiskubre, ug kini usa ka sukod nga gibase sa mga resulta sa panukiduki.naandan” sa pagtuo nga kini makapatin-aw sa kaputli sa DNA ug RNA sausa ka sukod.Dili lamang kini ang sukaranan alang sa pag-ila sa ani ug kaputli sa nucleic acid, gigamit lamang kini isip usa ka pakisayran, ug dili kini usa ka "standard nga bulawan".

Ang Thermo Fisher ND-2000 nga manwal nagpasiugda sa pagkakasaligan sa mga resulta sa pagsulay

Ang hinungdan mao nga ang mga resulta nga nakuha pinaagi sa paggamit sa usa ka micro/ultramicro UV spectrophotometer nagpakita lamang sa abot ug kaputli sa nucleic acid gikan sa kilid, ug adunay daghang mga hinungdan nga nag-impluwensya (optical path, sample volume, sample nga konsentrasyon, pH value, uban pang mga ion nga makaapekto sa pagsukat sa pagsuyup, ug uban pa), ang gisukod nga OD nga bili dili kinahanglan nga tukma.Sa samang higayon, tungod sa kakulang sa specificity sa absorbance bili determinasyon nga materyal, single-stranded DNA, double-stranded DNA, RNA, dNTPs, ug pipila ka mga protina ang tanan adunay pagsuyup peak sa 260nm wavelength, ug ang konsentrasyon determinado sa A260 lamang dili kinahanglan ang tinuod nga DNA o RNA.Ang konsentrasyon, ug ang integridad ug pagkadaot niini dili mahukman.

Busa unsaon paghukom sa kalidad sa atong giputli nga nucleic acid?Dugang pa sa paggamit sa micro/ultramicro UV spectrophotometer para sa detection, ang mga pamaagi sama sa agarose gel electrophoresis gikinahanglan usab aron makita nga makita ang kaputli ug integridad sa nucleic acid, ug aron ipakita ang konsentrasyon sa usa ka sukod.Niining paagiha, ang nucleic acid yield ug kaputli nga nakuha gikan sa detection nga mga resulta sa lain-laing mga pamaagi kasaligan.

Pagtandi sa eksperimento nga tsart

Ang genomic DNA sa H1299 nga mga selula gikuha gamit ang kompanya nga A's DNA Extraction kits, ug nakita ang dakong kontaminasyon sa kahugawan, nga miresulta sa taas nga OD values

(OD pagsukod bili ug katugbang nga electropherogram)

Ebalwasyon index

Aduna bay "standard nga bulawan" alang sa ani sa nucleic acid ug kalidad nga pagsulay?

Sa atong nasayran, walay simple, paspas ug barato nga pamaagi.Bisan kung kini spectrophotometer, gel electrophoresis, o mass spectrometry, silang tanan nagpakita sa konsentrasyon ug kaputli sa nucleic acid sa solusyon gikan sa lainlaing mga aspeto, ug kinahanglan silang hukman pinaagi sa paghisgot sa usag usa.

Ang labing maayo nga evaluation index mao ang kanunayang follow-up nga eksperimento nga aplikasyon.Wala kini makaapekto sa kaepektibo sa reverse transcription ug PCR amplification.Ang pag-angkon ug kasaligan nga mga produkto sa amplification ug mga kantidad sa Ct, ug ang pagkuha sa usa ka kompleto nga pagkasunod-sunod pinaagi sa pagsunud usa ka malampuson nga pagkuha sa nucleic acid.

Sa pagsumada, ang panglantaw sa ratio-only theory kinahanglan nga hagiton sa panglantaw sa "paggamit sa maayo nga downstream experimental nga mga resulta isip maayong mga parameter sa pagkuha"!

Girekomendar nga Foregene DNA RNA extraction kits para makakuha ug taas nga DNA/RNA purity:

https://www.foreivd.com/reagent/dna-isolation-series/

https://www.foreivd.com/reagent/rna-isolation-series/