• facebook
  • linkedin
  • youtube

PCR machine|Nakasabot ka ba?

Teknolohiya sa PCR nga nakadaog sa Nobel Prize

Sa 1993, ang Amerikanong siyentipiko nga si Mulis nakadawat sa Nobel Prize sa Chemistry, ug ang iyang nahimo mao ang pag-imbento sa teknolohiya sa PCR.Ang salamangka sa teknolohiya sa PCR anaa sa mosunod nga mga kinaiya: Una, ang gidaghanon sa DNA nga mapadako kay gamay ra kaayo, ug sa teoriya usa ka molekula ang mahimong gamiton alang sa pagpadako;ikaduha, ang amplification efficiency taas, ug ang gidaghanon sa target gene kay exponential.Pagpadako, labaw pa sa 10 milyon nga beses sa pipila ka oras.Karon ang instrumento sa PCR kaylap nga gigamit sa panukiduki sa siyensya sa kinabuhi ug daghang uban pang mga aspeto.

Ang lain-laing mga modelo ug mga tiggama sa mga thermal cyclers mahimong magpakita sa lain-laing performance ug repeatability.Kini nga mga kalainan makaapekto dili lamang sa kaepektibo sa PCR apan usab sa katukma ug pagkamakanunayon sa datos nga nakuha.Ang pagsabot sa mga feature sa PCR machine makatabang nato nga mapadako ang kalampusan sa atong mga eksperimento.

Module sa pagpainit

Ang katukma sa temperatura sa thermal cycler mahimong mahukmanon alang sa kalampusan o kapakyasan sa PCR.Ang maayo-sa-maayo nga pagkamakanunayon sa temperatura sa bloke sa pagpainit hinungdanon usab aron makuha ang kasaligan ug mabag-o nga mga resulta sa PCR.

Usa ka paagi aron masiguro ang katukma sa thermal mao ang pagsulay kanunay gamit ang mga kit sa pag-verify sa temperatura ug pag-recalibrate kung gikinahanglan sa usa ka nabansay nga propesyonal.Ang mga pagsulay sa pag-verify sa temperatura kasagarang gigamit sa:

Well-to-well accuracy kalabot sa pagtakda sa temperatura sa isothermal mode

Well-to-well accuracy kalabot sa pagtakda sa temperatura human sa pagkakabig sa temperatura

Heat Lid Temperatura Katukma

pagsabot1

Pagkontrol sa Temperatura sa Pag-ani sa Panguna

Ang pagkontrol sa temperatura sa gradient usa ka function sa instrumento sa PCR nga nagpadali sa pag-optimize sa primer annealing sa PCR.Ang katuyoan sa gradient setting mao ang pagkab-ot sa lain-laing mga temperatura sa taliwala sa mga modules, ug pinaagi sa ≥2 °C temperatura pagtaas ug pagkahulog sa taliwala sa matag kolum, lain-laing mga temperatura mahimong masulayan dungan aron makuha ang kamalaumon nga primer annealing temperatura.Sa teoriya, ang usa ka tinuod nga gradient nakab-ot ang linear nga temperatura tali sa mga module.

Bisan pa, ang naandan nga gradient nga mga thermal cyclers kasagarang mogamit sa usa ka thermal block ug pagkontrol sa temperatura pinaagi sa duha nga pagpainit ug pagpabugnaw nga mga elemento nga nahimutang sa duha ka tumoy, kanunay nga nagresulta sa mga musunud nga limitasyon:

Duha ra ka temperatura ang mahimong itakda: ang taas ug ubos nga temperatura alang sa primer annealing gibutang sa duha ka tumoy sa thermal module, ug ang tukma nga setting sa ubang mga temperatura dili makab-ot tali sa modulo.

Tungod sa pagbayloay sa kainit tali sa lain-laing mga kolum, ang temperatura tali sa lain-laing mga rehiyon sa module mas lagmit nga mosunod sa sigmoidal curve kay sa tinuod nga linear gradient.

pagsabot2

Sampol nga temperatura

Ang katakus sa thermal cycler nga makontrol ang sample nga temperatura hinungdanon kaayo alang sa katukma sa mga resulta sa PCR.Ang mga parameter nga espesipiko sa instrumento sama sa mga rate sa ramp, oras sa pagkupot, ug mga algorithm hinungdanon alang sa pagtagna sa temperatura sa sample.

Ang rate sa pagpainit ug pagpabugnaw sa makina sa PCR nagpasabut nga ang temperatura nagbag-o tali sa mga lakang sa PCR nga mahitabo sa usa ka piho nga yugto sa panahon.Tungod kay nagkinahanglan kini og usa ka piho nga panahon alang sa kainit nga mabalhin gikan sa module ngadto sa sample, ang aktwal nga pagpainit ug pagpabugnaw nga rate sa sample mahimong mas hinay.Busa, ang kahulugan sa katulin sa pagbag-o sa temperatura kinahanglan nga mailhan ug masabtan.

Ang maximum o peak module ramp rate nagrepresentar sa pinakapaspas nga pagbag-o sa temperatura nga makab-ot sa module sulod sa gamay kaayong yugto sa panahon atol sa rampa.

Ang kasagaran nga block ramp rate nagrepresentar sa rate sa pagbag-o sa temperatura sa mas taas nga yugto sa panahon ug maghatag usa ka labi ka representante nga sukod sa katulin sa makina sa PCR.

Ang pinakataas nga sample nga pagpainit ug pagpabugnaw nga rate ug ang kasagaran nga sample nga pagpainit ug pagpabugnaw nga rate nagpakita sa aktwal nga temperatura nga nakuha sa sample.Ang rate sa pagpainit ug pagpabugnaw sa sample maghatag ug mas tukma nga pagtandi sa performance sa PCR machine ug sa posibleng epekto niini sa resulta sa PCR.

Kung maghimo usa ka pagpuli sa cycler, girekomenda nga mogamit usa ka instrumento nga adunay programa nga ramp rate nga nag-simulate sa miaging mode para sa dali nga pag-ilis ug gamay nga epekto sa pagbalik-balik sa PCR.

pagsabot3

Ang thermal cycler kinahanglan nga gidisenyo sa oras nga mga lakang lamang human ang sample makaabot sa gitakda nga temperatura.Niining paagiha, ang oras nga ang sample gipadayon sa gitakda nga temperatura mas tukma nga mapadayon sa katugbang nga mga kondisyon sa siklo nga gikinahanglan sa operating procedure.

Ang mga thermal cyclers kasagarang mogamit ug komplikadong matematikal nga mga algoritmo aron maseguro nga ang mga sample dali nga makaabot sa gitakdang temperatura sumala sa preset nga programa.Base sa gidaghanon sa sistema sa reaksyon ug sa gibag-on sa PCR nga mga plastik nga gigamit, ang algorithm makatagna sa temperatura sa sample ug sa oras nga gikinahanglan aron maabot ang gitakda nga temperatura.Ang pagsalig sa kini nga mga algorithm, sa panahon sa pagpainit o pagpabugnaw nga proseso sa thermal cycler, ang block nga temperatura kasagaran molapas sa gitakda nga kantidad pinaagi sa usa ka proseso nga gitawag nga thermal block overshoot o undershoot.Ang ingon nga pag-setup nagsiguro nga ang sample makaabut sa gitakda nga temperatura sa labing madali nga mahimo nga wala’y pag-overshoot o pag-undershoot mismo.

Eksperimental nga throughput

Ang mga hinungdan nga makadugang sa throughput sa usa ka thermal cycler naglakip sa ramp rates, thermal block configurations, ug integration sa automation platforms.

Ang pagpainit ug pagpabugnaw nga rate sa thermal cycler nagrepresentar sa katulin diin kini makaabut sa gitakda nga temperatura.Ang mas paspas nga pagtaas ug pag-ubos sa temperatura, mas paspas ang pagdagan sa PCR, nga nagpasabut nga daghang mga eksperimento ang mahuman sa usa ka piho nga yugto sa panahon.Dugang pa, ang mga eksperimento mahimong mapadali pinaagi sa paggamit sa mas paspas nga DNA polymerases.

pagsabot4

Ang disenyo sa module sa thermal cycler hinungdanon usab alang sa mga eksperimento sa PCR.Pananglitan, ang mga mapuli nga mga module nagtugot sa pagka-flexible sa gidaghanon sa mga sample matag run.Dugang pa, ang mga modulo sa pagpainit nga adunay mga modulo nga makontrol sa tagsa-tagsa ka sulundon alang sa pagpadagan sa lainlaing mga programa sa PCR nga dungan sa usa ka thermal cycler.

pagsabot5

Para sa automated high-throughput PCR, ang software nga nagkontrol sa pipetting handling system kinahanglan nga programmable ug compatible.Ang mga automated nga sistema maayo alang sa paghimo sa high-throughput nga mga reaksyon sa PCR tungod kay kini mahimo nga padayon nga padaganon nga adunay gamay nga interbensyon sa tawo, sa ingon maminusan ang oras nga gikinahanglan alang sa manual nga pag-setup sa eksperimento ug pagdugang sa gidaghanon sa mga reaksyon sa usa ka yugto sa panahon.

Kasaligan, Kalig-on ug Kasegurohan sa Kalidad sa Thermal Cyclers

Dugang pa sa performance ug throughput nga kapabilidad, ang PCR machine kinahanglan usab nga makasugakod sa pipila ka balikbalik nga paggamit, kapit-os sa kinaiyahan, ug mga kondisyon sa pagpadala.Ang ubang mga tiggama mahimong magreport kung giunsa paghimo sa instrumento ang kasaligan ug mga pagsulay sa kalig-on.Ang katugbang nga PCR instrument detection naglakip sa:

Kasaligan: Ang mga mekanikal nga rig gigamit sa paghimo og balik-balik nga mga pagsulay sa kanunay nga gigamit nga mga sangkap sa instrumento sama sa thermal lids, control panels/touchscreens, ug temperature cycling modules.

Ang presyur sa palibot: Ang mga lawak sa kalikopan mahimong magamit aron masundog ang lainlaing mga kondisyon sa naandan nga mga eksperimento, sama sa temperatura, kaumog.

Pagsulay sa Pagpadala: Ang grabe nga shock ug vibration nga pagsulay mahimong ipahigayon sumala sa mga sumbanan sa International Safety Shipping Association aron masiguro nga ang instrumento makaabot sa wala madaot nga mga kondisyon sa operasyon.

pagsabot6

Garantiya ug serbisyo alang sa pagmentinar sa makina sa PCR

Bisan pa sa higpit nga pagkakasaligan ug pagsulay sa durability, ang mga thermal cyclers dili malikayan nga adunay mga teknikal nga isyu sa kinabuhi sa instrumento.Para sa kalinaw sa hunahuna, ang garantiya, serbisyo, ug pagmentinar sa tiggama kinahanglang tagdon sa pagpalit ug instrumento.

Ang pagka-flexible sa mga serbisyo sama sa on-site/return-to-factory maintenance, remote monitoring services, ug mga instrumento sa pag-ilis sa proseso sa pagmentinar, ug uban pa, aron makunhuran ang epekto sa episyente sa trabaho.

Ang gitas-on sa panahon sa warranty, ang oras sa pag-usab sa serbisyo, ang pagka-access sa teknikal nga suporta, ug ang mga kahanas sa propesyonal nga mga kawani sa suporta.

Kahimoan sa pag-instalar, operasyon, kooperasyon, ug pag-verify sa instrumento aron matubag ang mga kinahanglanon sa laboratoryo ug may kalabutan nga regulasyon.Ang mga serbisyo sa pagmentinar sama sa pag-verify sa temperatura, pagsulay, ug pag-calibrate magamit aron masiguro nga ang instrumento molihok sa husto uban ang katugbang nga mga parameter.

May Kalabutan nga mga Produkto:

pagsabot7pagsabot8


Oras sa pag-post: Okt-18-2022