Ang pagsulay sa laboratoryo nagsugod sa pagkolekta sa sampol, ug ang pagkolekta sa sample mao ang labing dali nga makalimtan.Ang labing hinungdanon nga butang alang sa pagkolekta sa sampol mao ang pagpili sa husto nga tipo sa sampol, paggamit sa angay nga mga himan sa sampling, ug paghimo sa makatarunganon nga transportasyon ug pagproseso.

I. Sample nga tipo

Ang kasagarang mga tipo sa sample mao ang mosunod:

Ang pamaagi sa sampling mahimong magtumong sa teknikal nga mga detalye alang sa pag-monitor sa kalikopan sa bag-ong coronavirus sa merkado sa agrikultura (bazaar) ”:

1. Swab sample gikan sa throat swabs, kamot, sinina ug uban pang mga butang sa mga practitioner: gikinahanglan nga gamiton ang virus preservation solution sa virus sampling tube ug bug-os nga ilusot ang sampling cotton swabs.Ang nawong sa yuta) balik-balik nga gipadapat ug gihugasan sa sobra sa 3 ka beses.Sa samang higayon, gikinahanglan ang paghimo sa multi-point distributed sampling sa ibabaw sa sampol nga butang.

2. Food surface swab samples: Ang mga sample sa pagkaon dili direktang makolekta.Ang pagkaon nga kolektahon kinahanglan nga ibulag pag-ayo ug ibutang sa usa ka limpyo nga sampling bag sa dili pa mangolekta og mga sample sa swab.Gikinahanglan nga gamiton ang solusyon sa pagpreserba sa virus sa tubo sa sampling sa virus, pagkahuman hingpit nga ihumol ang sampling cotton swab, aron balik-balik nga pahid ug hugasan ang nawong sa sample sa pagkaon nga makolekta labaw sa 3 ka beses.Sa samang higayon, gikinahanglan ang paghimo sa multi-point distributed sampling sa sample surface.

3. Mga sampol sa hugaw: Sumala sa pag-apod-apod sa drainage system sa merkado, pilia ang 2-3 nga mga dapit sa pag-sampol sa sewage, nga nagtutok sa internal nga koleksyon sa pipe network, ang ubos nga agianan sa agianan sa tubig nga direksyon, o ang koneksyon sa municipal pipe network.Para makakolekta ug swab sample, ituslob kini sa hugaw gamit ang sampling cotton swab para ma-adsorb ang hugaw ug mahugasan kini sa sampling tube labaw sa 3 ka beses.Aron makolekta ang mga sample sa sewage, gamita ang polyethylene nga mga plastik nga botelya aron makolekta ang 30-500 mL nga sample sa tubig sa hugaw;alang sa pagkolekta sa sewage nga adunay gidaghanon nga labaw pa sa 500 mL, polyethylene plastic bucket o on-site nga sample sa tubig mahimong gamiton ang espesyal nga enrichment equipment.Sa samang higayon, gikinahanglan ang pagpahigayon og multi-point distributed sampling alang sa sewage sampling nga lokasyon.

4. Mga sample sa mananap: Alang sa buhi nga mga mananap, ang sampling swab mahimong gamiton sa pagkolekta sa body surface swabs, oropharyngeal swabs ug anal swabs, ug ang excrement o secretion sample mahimo usab nga kolektahon ug irekord sumala sa record sheet.Alang sa mga sample sa hayop nga gipanitan, ug uban pa, gamita ang cotton swab aron makolekta ang mga sample sa ibabaw sa lawas ug lungag sa lawas.Gikinahanglan nga gamiton ang solusyon sa pagpreserba sa virus sa virus sampling tube aron hingpit nga makalusot sa sampling cotton swab, ug unya sublion ang paggamit sa nawong sa sample sa pagkaon nga kolektahon.Kapin sa 3 ka beses ang shabu.Sa samang higayon, gikinahanglan ang paghimo sa multi-point distributed sampling sa sample surface.

5. Ubang mga appliances: mga sudlanan alang sa pagdala ug pagpasanay sa mga mananap sama sa mga hawla o mga tangke sa isda.Una, obserbahan o sabta ang piho nga mga matang sa mga hayop nga gitipigan ug gipasanay sa sudlanan, ug pagkolekta ug swab sample sa sulod nga bungbong sa sudlanan o mga liquid sample sa sulod.

6. Pagkolekta ug mga sampol sa aerosol sa mga dapit diin ang mga tawo magtapok, dili maayo nga bentilasyon sa lokal nga mga lugar nga patigayon, mga opisina, ug mga lawak-pahulayan.

II.Mga himan sa sampling
1. Tube sa pagkolekta sa dugo
Kung kinahanglan nimo nga himuon ang pagsulay sa nucleic acid ug mga sampol sa anticoagulant sa ulahi, girekomenda nga mogamit usa ka vacuum nga sudlanan sa dugo nga adunay sulud nga EDTA anticoagulant aron makolekta ang dugo;alang sa serum sample, kini girekomendar sa paggamit sa usa ka vacuum sa dugo nga sudlanan nga walay anticoagulant.

2. Sampling swab

Girekomenda nga gamiton ang polypropylene swabs imbes nga calcium alginate swabs o swab nga adunay mga poste nga kahoy, tungod kay mahimo kini adunay mga sangkap nga dili aktibo sa pipila nga mga virus ug makapugong sa pagsulay sa PCR.Ang mga swab nga adunay mga ulo sa gapas dili magamit, tungod kay ang mga lanot sa gapas adunay kusog nga adsorption sa protina ug dili dali nga ma-eluted sa sunod nga solusyon sa pagpreserba.

Sa "Technical Specifications for 10-in-1 Mixed Collection and Detection of New Coronavirus Nucleic Acids", klaro nga gitakda nga "ang sampling swab kinahanglan nga gama sa polyester, nylon ug uban pang non-cotton ug non-calcium alginate nga mga materyales, ug ang kuptanan kinahanglan nga hinimo sa dili kahoy nga materyal.Ang breaking point mga 3cm gikan sa ibabaw sa swab head, nga dali mabuak.

Gihisgotan usab sa CDC sa Estados Unidos ang "Gamit lamang ang mga sintetikong fiber swab nga adunay plastik o wire shafts.Ayaw gamita ang calcium alginate swab o swab nga adunay mga shaft nga kahoy,tungod kay kini adunay mga substansiya nga dili aktibo sa pipila ka mga virus ug makapugong sa pagsulay sa PCR.

Sa pagkakaron kaylap nga gigamit mao ang usa ka disposable sterile nylon flocking swab inubanan sa usa ka plastik nga sungkod.Ang flocking swab adunay mas maayo nga pagsuyup sa tubig ug rate sa pagpagawas.Sumala sa lain-laing mga sampling site, ang swab ulo usab adunay lain-laing mga gidak-on ug lanot.Ang gibag-on.”

3. Sample nga solusyon sa pagpreserba sa transportasyon

Ang solusyon sa pagpreserba sa dili aktibo nga virus: usa ka angay nga kantidad sa konsentrasyon sa asin sa guanidine ug lainlaing mga sangkap sa lysis sa virus mahimong direkta nga mag-lyse sa virus aron buhian ang nucleic acid, dili aktibo ang RNase ug DNase, ug masiguro ang integridad sa nucleic acid, nga magamit alang sa sunod nga pag-ila sa qPCR.Dili kini magamit alang sa pagpananom ug pag-inusara sa virus.

Ang solusyon sa transportasyon ug pagpreserbar sa virus: adunay mga asin, amino acid, bitamina, glucose ug protina nga gikinahanglan alang sa pagkaluwas sa virus, nga makapadayon sa kalihokan sa virus.Mahimo kini gamiton alang sa pagkuha sa nucleic acid ug pag-ila sa virus sa umaabot, ug mahimo usab kini gamiton alang sa pagtikad ug pagbulag sa virus.

4. Sample preservation tube ug sample bag

Ang sample storage tube kinahanglan nga usa ka sterile plastic tube nga adunay screw cap nga dili mo-adsorb sa nucleic acid.Ang matag sample tube kinahanglang tabunan og sample bag aron malikayan ang leakage ug kontaminasyon sa sample.

III.Makabalda nga mga substansiya sa sample

Mga makabalda nga sangkap sa mga eksperimento sa PCR

1. endogenous interferent

Ang mga substansiya nga anaa sa sample sa lawas mahimong makabalda sa pagkakita sa ubang mga substansiya.

Dugo:heme (>1mg/ml), hemin (>0.1ng/μl), triglycerides, IgG, ug uban pa;

Ihi:Urea (20mM);

Bangko:tanom nga polysaccharides, cholate;

Tissue:protease, collagen;

Gatas: protease, calcium ion;

Droga: antibiotics, antiviral drugs, hormones, etc.

uban.

2. exogenous nga pagpanghilabot

Naggikan kini sa mga substansiya nga mahimong makabalda sa pagkakita sa ubang mga substansiya sa vitro.Sample nga mga additives ug mga substansiya nga mahimong makontak sa panahon sa pagkolekta ug pagproseso sa sample:

Mga gamit sa pagsulay: serum separation gel, sample collection container ug rubber stopper, catheter, catheter flushing fluid, glove powder, etc.

Anticoagulant: heparin (>0.1 U/mL), EDTA (>0.5 mM), ug uban pa;

Mga organikong solvent: isopropanol (>0.1 IU/ml), betaine, dimethyl sulfoxide, formamide, glycerin, PEG, ug uban pa;

Mga disinfectant: alkohol (ethanol>1%), aldehydes, phenols (phenol>0.2%), peroxide, lig-on nga mga asido (HCL), lig-on nga alkalis (NaOH), ug uban pa;

Detergent:SDS (>0.005%);

Yuta: Humus

Tina: Indigo

uban.

Ubos sa aktuwal nga mga kahimtang sa sampling sa gawas, sama sa pagkolekta sa mga sampol sa kalikopan, ang mga sampol mahimong adunay lainlaing mga makabalda nga sangkap, ug ang komposisyon sa mga makabalda nga sangkap sa matag lokasyon lainlain, nga nanginahanglan mga eksperimento sa interference sa PCR nga himuon sumala sa lokal nga mga kondisyon.

IV.Sample nga pagtipig ug mga kondisyon sa transportasyon

Ang bag-ong nakolekta nga clinical specimens kinahanglang ipadala sa laboratoryo sulod sa 2 ngadto sa 4 ka oras human sa pagkolekta sa 2°C ngadto sa 8°C.Tipigi sa 4 ℃ sulod sa 24h.Ang mga espesimen nga gigamit alang sa pag-inusara sa virus ug pagtuki sa nucleic acid kinahanglan nga sulayan sa labing madali.Ang mga specimen nga mahimong sulayan sulod sa 24 ka oras mahimong tipigan sa 4°C;ang mga specimen nga dili makit-an sulod sa 24 ka oras kinahanglang tipigan sa -70°C o ubos pa (kon dili- Tipigi sa 70°C sa refrigerator sa -20°C).

Summary:Ang estandard nga pagkolekta, transportasyon ug pagtipig sa mga sample kinahanglanon alang sa sunod nga pagsulay.Ang mga sayup nga negatibo sa daghang mga pagsulay sa laboratoryo tungod sa dili husto nga pagkolekta, transportasyon ug pagtipig sa mga sample nga nagdala sa pagkadaot sa viral nucleic acid.Bisan pa, daghang mga laboratoryo sa gihapon wala magtagad sa kamahinungdanon sa sampling.Nanghinaut ko nga kini nga artikulo makapukaw sa atensyon sa tanan sa sampling ug makahimo og mas siyentipiko ug makatarunganon nga sampling!

May kalabotan nga produkto:

SARS-CoV-2 Variant Nucleic Acid Detection Kit (I) (Multiplex PCR Fluorescent Probe Method)-Alang sa Detection sa Mutants Gikan sa Brazil, South Africa, Ug UK