Mga Tip sa Pag-ayo sa Glue Recovery

1. Dugangi ang sample load atol sa electrophoresis.

2. Gamita ang bag-ong giandam nga electrophoresis buffer.

3. Sa pagputol sa glue, sulayi nga putlon lamang ang glue gamit ang mga strips aron makunhuran ang gidaghanon sa pagputol sa glue: dili kinahanglan ang glue nga adunay pipila ka mga tipik sa katuyoan, kung dili kini makaapekto sa recovery rate.

4. Human matunaw ang duha o labaw pa nga mga piraso sa papilit, gamita ang usa ka tubo bisan unsa pa kadako ang volume ug ibalhin kini sa parehas nga kolum.

5. Ang solusyon nga gidugang sa sol mahimo nga usa ka gamay pa, nga mas maayo sa pagbugkos sa DNA sa lamad, apan sa kasagaran dili molapas sa 750ul.

6. Ang yawe sa pagbawi sa gel mao ang pagbugkos sa DNA sa kolum pinaagi sa konsentrasyon sa asin, acidity (charge) ug hydrophobicity sa solusyon sa kolum.Busa, kung ang pH sa electrophoresis buffer taas kaayo, ang 10ul (pH 5.0, 3mol/L NaAC) mahimong idugang sa sol;aron mas maayo nga mabalda ang mga molekula sa DNA sa lamad, ang 30% nga isopropanol mahimong idugang sa kainit sa likido pagkahuman matunaw ang papilit.

7. Sa dili pa idugang ang eluent, ibilin ang kolum sa temperatura sa lawak sulod sa pipila ka minuto (mga 10 minutos) aron hingpit nga maalisngaw ang ethanol.

8. Sa katapusan, dugangi ang dili kaayo eluent aron mamenosan ang gidaghanon sa pagkaayo.Kasagaran, ang 30-50μl nga eluent gigamit alang sa elution (dili kaayo gamay, kung dili kini makabasa sa lamad, nga dili maayo sa elution);ang elution droplets anaa sa sentro sa lamad, aron bug-os nga mawagtang ang DNA nga gigapos sa lamad.

9. Human sa pagdugang sa eluent, kini mahimong eluted sa usa ka tubig bath sa 55 degrees alang sa 5 minutos o ibutang sa usa ka tubig bath sa 50 degrees alang sa labaw pa kay sa 10 minutos, o silyado sa usa ka parafilm sa 4 degrees sa tibuok gabii, ug unya centrifuged alang sa pagkaayo sa sunod nga adlaw, ang epekto mao ang maayo.

10. Idugang ang centrifuged eluate balik sa adsorption column ug centrifuge pag-usab.

Detalyado nga mga pamaagi ug pamaagi alang sa pagbawi sa produkto sa PCR

1. Ordinaryo nga pag-recycle sa goma

Kung gusto nimo mabawi ang papilit, labing maayo nga mogamit usa ka kit, nga kombenyente ug adunay gamay nga taas nga rate sa pagkaayo.Kung kinahanglan nimo nga mabawi kini nga mano-mano, mahimo nimong idugang ang 3 ka beses sa gidaghanon sa TE pagkahuman sa pagputol sa papilit.Human matunaw sa usa ka kaligoanan sa tubig, ang phenol, phenol/chloroform makuha nga limpyo, ug ang ethanol ma-precipitate.Mao na.

2. Pagbawi sa DNA gikan sa ubos nga melting point gels

Pagputli sa mga Tipik sa DNA Idugang ang TE (10 mmol/l Tris-HCl pH8.0, 0.1 mmol/l EDTA) nga katumbas sa gidaghanon sa gel, ug ibutang sa 65°C nga kaligoanan sa tubig sulod sa 5 minutos aron hingpit nga matunaw ang gel.

Human kini dad-on sa temperatura sa lawak, usa ka patas nga gidaghanon sa phenol (saturated sa TE, TE ang gisilyohan sa ibabaw nga layer, ug ang ubos nga layer sa phenol gikuha) gidugang, ug ang sagol nga hinayhinay nga gisagol (walay pagsagol nga gikinahanglan), ug centrifuged sa 12,000 rpm sulod sa 3 minutos.Balika ang 1-2 ka beses.

Dad-a ang supernatant, idugang ang 0.1 nga volume sa 3mol/L sodium acetate (pH 5.2) ug 2.5 ka beses nga volume sa absolute ethanol aron madala ang ethanol precipitation.Dissolve ang giputli nga DNA nga adunay tukma nga kantidad sa TE, sukda ang sulud, ug pag-andam alang sa paggamit (kini magamit alang sa pagtuki sa istruktura sa target nga gene, pag-andam sa pagsusi, ug uban pa).

3. Pagbawi sa PCR nga adunay maayo nga espesipiko sa amplification

Kung maayo ang specificity sa PCR amplification, simple lang kini nga purification ug recovery sa PCR product.Mahimo nimong idugang ang 50ug/ml nga proteinase K sa produkto sa PCR, 37 degrees alang sa 1 ka oras, pagkuha kausa sa phenol/chloroform, pagkuha kausa sa chloroform, ug idugang ang 0.1 nga gidaghanon sa supernatant.Ang sodium acetate nakuha pinaagi sa ulan nga adunay 2.5 ka volume sa absolute ethanol.

May kalabotan nga mga produkto:

https://www.foreivd.com/pcr-purification-kit-2-product/

https://www.foreivd.com/blood-superdirecttm-pcr-kit-edta-product/