Unsa ang bakuna sa mRNA
Ang bakuna sa mRNA nagbalhin sa RNA sa mga selyula sa lawas aron ipahayag ug mahimo ang mga antigen sa protina pagkahuman sa mga may kalabotan nga pagbag-o sa vitro, sa ingon nagtultol sa lawas sa paghimo usa ka tubag sa resistensya batok sa antigen, sa ingon nagpalapad sa kapasidad sa resistensya sa lawas.[1,3].
Figure 1: Schematic diagram sa epekto sa direktang pag-inject sa mRNA nga bakuna [2]
Klasipikasyon sa mga bakuna sa mRNA
Ang mga bakuna sa mRNA gibahin sa duha ka klase:dili replikadomRNA ugpagpadako sa kaugalingonmRNA: ang self-amplifying mRNA dili lamang nag-encode sa target nga antigen, apan nag-encode usab sa replikasyon nga makahimo sa intracellular RNA amplification ug mekanismo sa ekspresyon sa protina.Ang non-replicating nga mga bakuna sa mRNA nag-encode lamang sa mga target nga antigen ug adunay 5'ug 3'untranslated regions (UTR).Naghatag sila og komprehensibo nga pagpadasig sa pagpahiangay ug kinaiyanhon nga resistensya, nga mao ang in situ nga ekspresyon sa antigen ug pagpasa sa signal sa peligro, ug adunay mga mosunod nga mga aplikasyon.[2,3]
● Makahatag ug komprehensibo nga pagpadasig sa adaptability ug innate immunity, nga mao ang in situ antigen expression ug danger signal transmission
●Mahimong magpahinabog "balanse" nga tubag sa imyunidad, lakip ang humoral ug cellular effectors ug immune memory
●Mahimong magkombinar sa lain-laing antigens nga dili madugangan ang pagkakomplikado sa pagporma sa bakuna
●Ang padayon nga pag-uswag sa immune potential makab-ot pinaagi sa balikbalik nga pagbakuna, ug walay o gamay nga immune response sa carrier
●Ang heat stable nga mRNA nga mga bakuna makapasayon sa transportasyon ug pagtipig sa mga bakuna
Figure 2: Schematic diagram sa mRNA vaccine ug ang antigen expression mechanism niini [4]
Mga bahin sa mga bakuna sa mRNA
Kung itandi sa tradisyonal nga mga bakuna, ang mga bakuna sa mRNA adunay yano nga mga proseso sa produksiyon, paspas nga katulin sa pag-uswag, wala’y kinahanglan nga kultura sa cell, ug mubu nga gasto.Kung itandi sa mga bakuna sa DNA, ang mga bakuna sa mRNA dili kinahanglan nga mosulod sa nucleus ug wala’y peligro nga maapil sa host genome.Ang katunga sa kinabuhi mahimong ipasibo pinaagi sa pagbag-o.
Talaan 1: Mga bentaha ug disbentaha sa mga bakuna sa mRNA
|
| Bentaha | Kakulangan |
| bakuna sa mRNA | Ang paspas nga panukiduki ug pag-uswag, ang paghimo sa bakuna molungtad lamang og 40 ka adlaw | Pag-trigger sa dili kinahanglan nga immune response
|
| Ang pagkawalay kalig-on sa mRNA ubos sa mga kondisyon sa physiological, dali nga madaot | Dili i-integrate sa genome aron malikayan ang posibleng therapeutic mutation
| |
| Dili kinahanglan ang bisan unsang signal sa lokalisasyon sa nukleyar, transkripsyon | Ang pagka-epektibo sa nukleyar sa kaluwasan nagpabilin nga mapamatud-an
|
Figure 3: Flow chart sa paghimo ug pagpangandam sa bakuna sa mRNA [4]
Foregene Viral RNA Isolation kit
RT-qPCR Sayon (Usa ka Lakang)
Gipauswag nga mga estratehiya alang sa pag-andam sa mga bakuna sa mRNA
Tungod sa dili maayo nga kalig-on sa mRNA mismo, dali nga pagkadaot sa mga nucleases sa mga tisyu, ubos nga kahusayan sa pagsulod sa cell, ug ubos nga kahusayan sa paghubad, kini nga mga depekto naglimite sa paggamit sa mga bakuna sa mRNA.Ang pagkaepisyente sa paghubad adunay hinungdanon usab nga papel.Ang mga salakyanan sa paghatud mahimong bahinon sa mga viral vector ug non-viral vectors (lakip ang mga liposome, non-liposomes, mga virus, nanoparticle, ug uban pa).Busa, gikinahanglan ang may kalabotan nga mga lakang sa pagpaayo.Ang mosunud usa ka estratehiya sa pagpaayo sa pharmacological alang sa pag-andam sa mRNA[2]
1 Pag-synthesize sa cap analogues o paggamit sa capping enzymes aron ma-stabilize ang mRNA ug madugangan ang paghubad sa protina pinaagi sa pagbugkos sa eukaryotic translation initiation factor 4E (EIF4E)
2 I-adjust ang mga elemento sa 5′-untranslated region (UTR) ug 3′-UTR aron ma-stabilize ang mRNA ug madugangan ang paghubad sa protina
3 Ang pagdugang sa Poly(A) nga ikog makapalig-on sa mRNA ug makadugang sa paghubad sa protina
4 Gibag-o nga mga nucleoside aron makunhuran ang natural nga pagpaaktibo sa immune ug madugangan ang paghubad
5 Ang pagtambal sa RNase III ug paspas nga protina nga liquid chromatography (FPLC) nga pagputli makapakunhod sa pagpaaktibo sa immune ug makadugang sa paghubad
6 I-optimize ang mga han-ay o mga codon aron madugangan ang paghubad
7 Co-delivery sa mga hinungdan sa pagsugod sa paghubad ug uban pang mga pamaagi aron mabag-o ang paghubad ug immunogenicity
Hulagway 4: In vitro transcription (IVT) mRNA produksyon ug proseso sa asembliya [5]
Dagkong pag-andam sa plasmid DNA
Ang plasmid DNA purification nag-una nga nagtangtang sa mga kontaminante sama sa RNA, open-circle DNA endotoxin, host protein ug host nucleic acid, ug kasagaran nag-usab sa recombinant nga plasmid ngadto sa E. coli.Ang E. coli moagi sa high-density fermentation, dayon solid-liquid separation, ug pagkolekta sa E. coli.Ang E. coli dayon gipailalom sa alkaline lysis, centrifugal solid-liquid separation ug microfiltration clarification human sa lysis, ultrafiltration ug konsentrasyon human sa clarification, ug dayon chromatographic purification.
Pagputli sa plasmid DNA:
Foregene General Plasmid Mini Kit
【1】苗鹤凡, 郭勇, 江新香.mRNA疫苗研究进展及挑战[J].免疫学杂志, 2016(05):446-449.
【2】Pardi N, Hogan MJ, Porter FW, ug uban pa.Mga bakuna sa mRNA - usa ka bag-ong panahon sa vaccinology[J].Mga Pagrepaso sa Kinaiyahan sa Drug Discovery, 2018.
【3】Kramps T., Elbers K. (2017) Pasiuna sa RNA Vaccines.Sa: Kramps T., Elbers K. (eds) RNA Vaccines.Pamaagi sa Molecular Biology, vol 1499. Humana Press, New York, NY.
【4】Maruggi G, Zhang C, Li J, ug uban pa.mRNA isip usa ka Transformative Technology alang sa Vaccine Development aron makontrol ang Makatakod nga mga Sakit [J].Molecular Therapy, 2019.
【5】Sergio Linares-Fernández, Céline Lacroix, , Pagpahiangay sa Bakuna sa mRNA aron Balanse ang Innate/Adaptive Immune Response, Trends sa Molecular Medicine, Tomo 26, Isyu 3,2020, Panid 311-323.
Oras sa pag-post: Aug-05-2021
