Ang mga antibodies, nga gitawag usab nga immunoglobulins (Ig), maoy mga glycoprotein nga espesipikong nagbugkos sa mga antigen.
 
Ang naandan nga pag-andam sa antibody gihimo pinaagi sa pagbakuna sa mga hayop ug pagkolekta sa antiserum.Busa, ang antiserum kasagarang adunay mga antibodies batok sa uban nga wala'y kalabutan nga mga antigen ug uban pang mga sangkap sa protina sa serum.Ang mga molekula sa kinatibuk-ang antigen kasagaran adunay daghang lainlaing mga epitope, busa ang naandan nga mga antibodies usa usab ka sinagol nga mga antibodies batok sa daghang lainlaing mga epitope.Bisan ang naandan nga serum antibodies nga gitumong batok sa parehas nga epitope gilangkuban gihapon sa mga heterogenous antibodies nga gihimo sa lainlaing mga B cell clone.Busa, ang naandan nga serum antibodies gitawag usab nga polyclonal antibodies, o polyclonal antibodies sa mubo.
 
Ang monoclonal antibody (monoclonal antibody) usa ka uniporme nga antibody nga gihimo sa usa ka B cell clone ug gitumong lamang batok sa usa ka piho nga epitope.Kini kasagarang giandam sa hybridoma nga teknolohiya—hybridoma antibody nga teknolohiya gibase sa cell fusion nga teknolohiya, nga naghiusa sa B nga mga selula nga adunay abilidad sa pagtago sa piho nga mga antibodies ug myeloma nga mga selula nga adunay walay katapusan nga kapasidad sa pagtubo ngadto sa B-cell hybridomas.Kini nga hybridoma cell adunay mga kinaiya sa usa ka ginikanan nga selula.Mahimo kini nga modaghan hangtod sa hangtod ug imortal nga in vitro sama sa mga selula sa myeloma, ug mahimo kini nga mag-synthesize ug magpagawas sa piho nga mga antibodies sama sa splenic lymphocytes.Pinaagi sa cloning, usa ka monoclonal nga linya nga nakuha gikan sa usa ka hybridoma cell, nga mao, usa ka hybridoma cell line, mahimong makuha.Ang mga antibodies nga gipatungha niini mga homogenous nga antibodies batok sa parehas nga antigenic determinant, nga mao, monoclonal antibodies.
 
Ang mga antibodies naglungtad isip usa o daghan pang Y-shaped nga monomer (ie, monoclonal antibodies o polyclonal antibodies).Ang matag Y-shaped nga monomer gilangkuban sa 4 ka polypeptide chain, lakip ang duha ka parehas nga bug-at nga kadena ug duha ka parehas nga light chain.Ang gaan nga kadena ug bug-at nga kadena ginganlan sumala sa ilang molekular nga gibug-aton.Ang tumoy sa Y-shaped nga istruktura mao ang variable nga rehiyon, nga mao ang antigen binding site.(Kinutlo gikan sa Detai Bio-Monoclonal Antibody Concept)
 
Ang istruktura sa antibody
Bug-at nga kadena
Adunay lima ka matang sa mammalian Ig nga bug-at nga kadena, nga ginganlan sa mga letra nga Griyego nga α, δ, ε, γ, ug μ.Ang katugbang nga mga antibodies gitawag nga IgA, IgD, IgE, IgG, ug IgM.Nagkalainlain nga bug-at nga mga kadena lainlain ang gidak-on ug komposisyon.Ang α ug γ adunay gibana-bana nga 450 ka amino acid, samtang ang μ ug ε adunay gibana-bana nga 550 ka amino acid.
Ang matag bug-at nga kadena adunay duha ka rehiyon: ang kanunay nga rehiyon ug ang variable nga rehiyon.Ang tanan nga mga antibodies sa parehas nga tipo adunay parehas nga kanunay nga rehiyon, apan adunay mga kalainan tali sa mga antibodies sa lainlaing mga lahi.Ang kanunay nga mga rehiyon sa bug-at nga mga kadena γ, α, ug δ gilangkuban sa tulo ka Ig nga dominyo sa tandem, nga adunay bisagra nga rehiyon aron madugangan ang pagka-flexible niini;ang kanunay nga mga rehiyon sa bug-at nga kadena μ ug ε gilangkuban sa 4 Ig domain.Ang lainlain nga rehiyon sa bug-at nga kadena sa antibody nga gihimo sa lainlaing mga B cell lahi, apan ang variable nga rehiyon sa antibody nga gihimo sa parehas nga B cell o cell clone parehas, ug ang variable nga rehiyon sa matag bug-at nga kadena mga 110 ka amino acid ang gitas-on., Ug paghimo ug usa ka Ig domain.
 
Gaan nga kadena
Adunay duha lamang ka matang sa light chain sa mammal: lambda type ug kappa type.Ang matag light chain adunay duha ka nalambigit nga domain: usa ka kanunay nga rehiyon ug usa ka variable nga rehiyon.Ang gitas-on sa kahayag nga kadena mao ang mahitungod sa 211 ~ 217 amino acids.Ang duha ka light chain nga anaa sa matag antibody kanunay nga pareho.Para sa mga mammal, ang light chain sa matag antibody adunay usa lang ka klase: kappa o lambda.Sa pipila ka ubos nga vertebrates, sama sa cartilaginous fishes (cartilage fishes) ug bony fishes, ang ubang mga matang sa light chains sama sa iota (iota) type makita usab.
 
Mga bahin sa Fab ug Fc
Ang bahin sa Fc mahimong direktang ikombinar sa mga enzyme o mga tina nga fluorescent aron mamarkahan ang mga antibodies.Kini mao ang bahin diin ang antibody rivet sa plato sa panahon sa proseso sa ELISA, ug kini usab ang bahin diin ang ikaduhang antibody giila ug gigapos sa immunoprecipitation, immunoblotting ug immunohistochemistry.Ang mga antibodies mahimong ma-hydrolyzed sa duha ka bahin sa F(ab) ug usa ka bahin sa Fc pinaagi sa mga proteolytic enzymes sama sa papain, o mahimo silang mabuak gikan sa rehiyon sa bisagra pinaagi sa pepsin ug ma-hydrolyzed sa usa ka bahin sa F (ab)2 ug usa ka bahin sa Fc.Ang mga tipik sa IgG antibody usahay mapuslanon kaayo.Tungod sa kakulang sa bahin sa Fc, ang bahin sa F(ab) dili mag-agay sa antigen, ni makuha kini sa mga immune cells sa mga pagtuon sa vivo.Tungod sa gagmay nga mga tipik sa molekula ug kakulang sa function sa cross-linking (tungod sa kakulang sa bahin sa Fc), ang bahin sa Fab sagad gigamit alang sa radiolabeling sa mga pagtuon sa pag-andar, ug ang bahin sa Fc labi nga gigamit ingon usa ka ahente sa pag-block sa histochemical staining.
 
Variable ug makanunayon nga mga rehiyon
Ang variable nga rehiyon (rehiyon sa V) nahimutang sa 1/5 o 1/4 (nga adunay mga 118 nga amino acid residues) sa H chain duol sa N-terminus ug 1/2 (nga adunay mga 108-111 amino acid residues) duol sa N-terminus sa L chain .Ang matag V nga rehiyon adunay usa ka peptide singsing nga naporma pinaagi sa intra-chain disulfide bonds, ug ang matag peptide ring adunay gibana-bana nga 67 ngadto sa 75 amino acid residues.Ang komposisyon ug kahikayan sa mga amino acid sa V nga rehiyon nagtino sa antigen binding specificity sa antibody.Tungod sa kanunay nga nagbag-o nga mga tipo ug han-ay sa mga amino acid sa V nga rehiyon, daghang mga klase sa antibodies nga adunay lainlaing mga piho nga nagbugkos nga antigen ang mahimong maporma.Ang V nga mga rehiyon sa L chain ug H chain gitawag nga VL ug VH, matag usa.Sa VL ug VH, ang komposisyon sa amino acid ug pagkasunod-sunod sa pipila ka mga lokal nga rehiyon adunay mas taas nga ang-ang sa kalainan.Kini nga mga rehiyon gitawag nga hypervariable regions (HVR).Ang komposisyon sa amino acid ug kahikayan sa mga non-HVR nga mga bahin sa V nga rehiyon medyo konserbatibo, nga gitawag nga framework region.Adunay tulo ka hypervariable nga mga rehiyon sa VL, kasagaran nahimutang sa amino acid residues 24 ngadto sa 34 ug 89 ngadto sa 97 matag usa.Ang tulo ka HVR sa VL ug VH gitawag nga HVR1, HVR2 ug HVR3, matag usa.Ang panukiduki ug pagtuki sa X-ray crystal diffraction nagpamatuod nga ang hypervariable nga rehiyon mao gayud ang dapit diin ang antibody antigen nagbugkos, mao nga gitawag kini nga complementarity-determining region (CDR).Ang HVR1, HVR2 ug HVR3 sa VL ug VH mahimong tawgon nga CDR1, CDR2 ug CDR3.Kasagaran, ang CDR3 adunay mas taas nga lebel sa hypervariability.Ang hypervariable nga rehiyon mao usab ang nag-unang lokasyon diin ang idiotypic determinants sa Ig molekula anaa.Sa kadaghanan nga mga kaso, ang H chain adunay mas hinungdanon nga papel sa pagbugkos sa antigen.
Ang kanunay nga rehiyon (C nga rehiyon)nahimutang sa 3/4 o 4/5 (gibana-bana gikan sa amino acid 119 ngadto sa C terminal) sa H chain duol sa C terminal ug 1/2 (naglangkob sa mga 105 amino acid residues) duol sa C terminal sa L chain.Ang matag functional nga rehiyon sa H chain adunay mga 110 ka amino acid residues, ug adunay usa ka peptide ring nga gilangkoban sa 50-60 amino acid residues nga konektado sa disulfide bonds.Ang komposisyon ug kahikayan sa amino acid niini nga rehiyon medyo makanunayon sa samang mananap nga Ig isotype L nga kadena ug sa samang matang H nga kadena.Parehas, mahimo lamang kini nga espesipikong magbugkos sa katugbang nga antigen, apan ang istruktura sa rehiyon sa C parehas, nga mao, kini adunay parehas nga antigenicity.Ang kabayo nga anti-human IgG secondary antibody (o anti-antibody) mahimong ikombinar sa duha A kombinasyon sa antibodies (IgG) batok sa lain-laing mga exotoxins mahitabo.Kini usa ka hinungdanon nga sukaranan sa pag-andam sa mga sekondaryang antibodies ug paggamit sa fluorescein, isotopes, enzymes ug uban pang gimarkahan nga antibodies.
 
 
May Kalabutan nga mga Produkto:
Cell Direct RT-qPCR kit