• facebook
  • linkedin
  • youtube

Ang ubos nga ratio sa A260 / A230 kasagaran tungod sa mga hugaw nga adunay maximum nga pagsuyup sa wavelength sa 230nm.Atong tan-awon kon unsa ang naglakip niini nga mga hugaw:

  • Kasagarang mga hugaw

    Absorption wavelength

    Epekto sa ratio

    Protina

    ~ 230nm ug 280nm

    Dungan nga pagkunhod sa A260/A 280ug A260/A 280mga ratios

    Guanidine nga asin

    220-240 nm

    Bawasan ang A260/A 280ratio

    Phenol

    ~270nm

    -

    Trizol

    ~ 230nm ug 270nm

    Bawasan ang A260/A 280ratio

    EDTA

    ~230nm

    Bawasan ang A260/A 280ratio

    Ethanol

    230-240 nm

    Bawasan ang A260/A 280ratio

 
 
 
Absorption wavelength ug contrast value sa komon nga mga hugaw

Pkontaminasyon sa rotein
Ang polusyon sa protina mahimong isipon nga labing kasagarang polusyon sa proseso sa pagkuha sa nucleic acid.Ang protina anaa tali sa ibabaw nga bahin sa tubig ug sa ubosorganikohugna .Ang polusyon makapakunhod sa ratio sa A260/A280 ug A260/A230 sa samang higayon, ug ang ratio sa A260/A230 mausab nga mas klaro kay sa ratio sa A260/A280.
Atol sa sunod ngabalikbalik nga transkripsyonor Mga reaksyon sa qPCR, Ang mga residu sa protina mahimong makapugong o makabalda sa function sa enzyme.Ang labing maayo nga paagi aron malikayan ang kontaminasyon sa protina mao ang paghinumdom sa prinsipyo nga "dili kaayo daghan, gamay nga kantidad sa daghang mga higayon" kung mag-aspirar sa supernatant.

2. Guanidinium polusyon
hydrochloride (GuHCl) ug guanidine thiocyanate (GTC) adunay epekto sa pag-denaturing sa mga protina, nga dali nga makaguba sa mga lamad sa cell sa panahon sa proseso sa pagkuha sa nucleic acid, hinungdan sa denaturation sa protina ug pag-ulan.Ang pagsuyup sa wavelength sa GuHCl ug GTC anaa sa taliwala sa 220-240 nm, ug angAng nahabilin nga asin nga guanidinium makapakunhod sa ratio sa A260 / A230.Bisan kung ang nahabilin nga asin nga guanidinium makapakunhod sa ratio,ang epekto sa downstream eksperimento mao ang tinuod nga walay pagtagad.

3. Ang kontaminasyon sa Trizol
Ang nag-unang sangkap sa Trizol mao ang phenol.Ang panguna nga gimbuhaton sa phenol mao ang pag-lyse sa mga selyula ug pagpagawas sa mga protina ug mga sangkap sa nucleic acid sa mga selyula.Bisan kung ang phenol mahimong epektibo nga mag-denatur sa mga protina, dili kini hingpit nga makapugong sa kalihokan sa RNase.Busa, ang 8-hydroxyquinoline, guanidine isothiocyanate, β-mercaptoethanol, ug uban pa gidugang sa TRIzol aron mapugngan ang endogenous ug exogenous RNase.
Kung gikuha ang cellular RNA, ang Trizol mahimong paspas nga mag-lyse sa mga selyula ug makapugong sa nuclease nga gipagawas gikan sa mga selyula, ug ang nahabilin nga Trizol makapakunhod sa ratio sa A260 / A230.
Pamaagi sa pagproseso: Sa diha nga ang centrifuging, kinahanglan nga matikdan nga ang phenol sa Trizol dali nga matunaw sa bahin sa tubig ubos sa kondisyon nga 4 ° ug temperatura sa lawak.

4. Ang nahabilin nga ethanol
Ang ethanol gigamit sa kataposang proseso sa pagpa-precipitate sa DNA samtang nagtunaw sa mga salt ions nga mahimong igapos sa DNA.Ang pagsuyup sa wavelength sa pinakataaspagsuyup peak saethanol usab sa 230-240 nm, ngamakapakunhod usab sa ratio sa A260/A230.
Ang pamaagi sa paglikay sa ethanol residue mahimong gisubli sa makaduha sa panahon sa katapusan nga elution, paghuyop satabon sa asosulod sa duha ka minuto aron tugutan ang ethanol nga hingpit nga moalisngaw sa dili pa idugang ang buffer para sa elution.
Bisan pa, kinahanglan mahibal-an nga ang ratio usa lamang ka indeks sa pagtimbang-timbang sa kalidad sa RNA.Kung ang mga operasyon nga gihisgutan sa ibabaw hugot nga gi-regulate, ang pagtipas tali sa ratio ug ang standard range dili adunay dako nga epekto sa mga eksperimento sa ubos.
May Kalabutan nga mga Produkto:
Animal Total RNA Isolation kit
Tanum Total RNA Isolation kit
Cell Total RNA Isolation kit
Tanum Total RNA Isolation kit Plus


Oras sa pag-post: Peb-10-2023