Animal Total RNA Isolation Kit Total RNA Extraction ug Purification Kits para sa Animal Tissues & Cell
Deskripsyon sa Kit:
Dali ug episyente nga makuha ang taas nga kaputli ug taas nga kalidad nga kinatibuk-ang RNA gikan sa lainlaing mga tisyu sa hayop.
Dili kinahanglan nga mabalaka bahin sa pagkadaot sa RNA.Ang tibuok sistema kay RNase-Free
Epektibo nga tangtangon ang DNA gamit ang DNA-Cleaning Column
Kuhaa ang DNA nga wala magdugang DNase
Yano-ang tanan nga mga operasyon nahuman sa temperatura sa kwarto
Paspas—mahuman ang operasyon sulod sa 30 minutos
Luwas—walay gigamit nga organikong reagent
Taas nga kaputli—OD260/280≈1.8-2.1
Mga Deskripsyon sa Kit
50 Preps, 200 Preps
Kini nga kit naggamit saspin column ug formulagipalambo sa among kompanya, nga makakuha sa taas nga kaputli ug taas nga kalidad nga kinatibuk-ang RNA gikan sa lainlaing mga tisyu sa hayop nga adunay taas nga kahusayan.Naghatag kini usa ka episyente nga Kolum sa Paglimpyo sa DNA, nga dali nga mabulag ug ma-adsorb ang genomic DNA gikan sa supernatant ug tissue lysate, yano ug makadaginot sa oras;Ang RNA-only Column mahimong epektibong makagapos sa RNA ug maproseso nga dungan sa usa ka talagsaon nga pormula Daghang sample.
Ang tibuok sistema kay RNase-Free, aron ang gikuha nga RNA dili madaot;Buffer RW1, Buffer RW2 buffer washing system, aron ang nakuha nga RNA walay protina, DNA, ion, ug organic compound nga polusyon.
Mga sangkap sa kit
| Animal Total RNA Isolation Kit | ||
| Mga sangkap sa kit | RE-03011 | RE-03014 |
| 50 T | 200 T | |
| Buffer RL1* | 25ml | 100ml |
| Buffer RL2 | 15ml | 60ml |
| Buffer RW1* | 25ml | 100ml |
| Buffer RW2 | 24ml | 96ml |
| RNase-Free ddH2O | 10ml | 40ml |
| RNA-lamang nga Kolum | 50 | 200 |
| Kolum sa Paglimpyo sa DNA | 50 | 200 |
| Manwal sa Instruksyon | 1 ka piraso | 1 ka piraso |
Impormasyon sa Produkto
| Format | Spin kolum | Ang sangkap sa paghinlo | Kolum sa foregene, reagent |
| Flux | 1-24 nga mga sampol | Oras kada prep | ~30 min (24 ka sample) |
| Centrifuge | Centrifuge sa lamesa | Pagbulag sa pyrolysis | Centrifugal separation |
| Sampol | tissue sa mananap;selda | Sample nga kantidad | Tissue: 10-20 mg;Cell:(1-5)×106 |
| Ang gidaghanon sa elution | 50-200 μL | Maximum nga loading volume | 850 μl |
Mga bahin ug bentaha
■ Dili kinahanglan nga mabalaka mahitungod sa RNA degradation;ang tibuok sistema kay RNase-Free
■ Epektibo nga tangtangon ang DNA-gamit ang DNA-Cleaning Column
■ Kuhaa ang DNA nga walay pagdugang DNase
■ Yano-ang tanan nga mga operasyon nahuman sa temperatura sa kwarto
■ Fast -operasyon mahimong makompleto sa 30 minutos
■ Luwas-walay gikinahanglan nga organikong reagent
■ Taas nga kaputli -OD260/280≈1.8-2.1
Aplikasyon sa kit
Angayan kini alang sa pagkuha ug pagputli sa kinatibuk-ang RNA gikan sa lainlaing presko o frozen nga mga tisyu sa hayop o kultura nga mga selula.
Mga parameter sa produkto
■ Downstream nga mga aplikasyon: first-strand cDNA synthesis, RT-PCR, molecular cloning, Northern Blot, etc.
■ Mga sampol: mga tisyu sa hayop, mga selula nga gikultura
■ Dosis: Tissues 10-20mg, Cells(2-5)×106
■ Maximum nga DNA binding capacity sa purification column: 80 μg
■ Ang gidaghanon sa elution: 50-200 μl
Diagram
Animal Total RNA Isolation Kit nga gitambalan 20mg
Lab-as nga mga sample sa mouse, kuhaa ang 5% nga giputli nga kinatibuk-ang RNA 1% agar
Glycogel electrophoresis
1: Spleen 2: Kidney
3: Atay 4: Kasingkasing
Pagtipig ug estante sa kinabuhi
Ang kit mahimong tipigan sulod sa 24 ka bulan sa temperatura sa lawak (15–25 ℃) o 2–8 ℃ sa mas taas nga panahon.Ang buffer RL1 mahimong tipigan sa 4 ℃ sulod sa 1 ka bulan human sa pagdugang sa β-mercapptoethanol (opsyonal).
Gisitar nga mga artikulo
1.KUNG: 18.808:Zheng, Q., Qin, F., Luo, R., ug uban pa.Ang mRNA-Loaded Lipid-Like Nanoparticles para sa Liver Base Editing Pinaagi sa Optimization sa Central Composite Design.Adv.Kalihokan.Mater.2021, 31, 2011068.doi:10.1002/adfm.202011068.
2.KUNG: 18.187:He X, Hong W, Yang J, ug uban pa.Ang spontaneous nga apoptosis sa mga selula sa therapeutic stem cell nga pag-andam adunay mga epekto sa immunomodulatory pinaagi sa pagpagawas sa phosphatidylserine.Signal Transduct Target Didto.2021 Hulyo 14;6(1):270.doi: 10.1038/s41392-021-00688-z.
3.KUNG: 17.97:Dai Z, Liu H, Liao J, ug uban pa.Ang pagbag-o sa N7-Methylguanosine tRNA nagpauswag sa paghubad sa oncogenic mRNA ug nagpasiugda sa pag-uswag sa intrahepatic cholangiocarcinoma.Mol Cell.2021 Hul 29:S1097-2765(21)00555-4.doi: 10.1016/j.molcel.2021.07.003.
4.KUNG: 9.225:Cao X, Shu Y, Chen Y, ug uban pa.Ang Mettl14-Mediated m6A nga Pagbag-o Nagpadali sa Pagbag-o sa Atay pinaagi sa Pagmentinar sa Endoplasmic Reticulum Homeostasis.Cell Mol Gastroenterol Hepatol.2021;12(2):633-651.doi: 10.1016/j.jcmgh.2021.04.001.
RNA isoaltion kits alang sa ubang sampol nga tinubdananaa:
Cell, tanom, viral, dugo, ug uban pa.
Wala makuha ang RNA o ubos ang abot sa RNA
Kasagaran adunay lainlaing mga hinungdan nga makaapekto sa pagkaayo sa pagkaayo, sama sa: sulud sa sample sa tisyu sa RNA, pamaagi sa operasyon, gidaghanon sa elution, ug uban pa.
1. Ice bath o cryogenic (4 °C) centrifugation gihimo atol sa operasyon.
Rekomendasyon: Pag-operate sa temperatura sa lawak (15-25 ° C) sa tibuok proseso, ayawg ice bath ug centrifuge sa ubos nga temperatura.
2. Dili husto nga pagpreserbar sa sample o sobra nga oras sa pagtipig sa sample.
Rekomendasyon: Tipigi ang mga sample sa -80 °C o i-freeze sa liquid nitrogen ug likayi ang balikbalik nga paggamit sa freeze-thaw;sulayi ang paggamit sa presko nga tisyu o kultura nga mga selula alang sa pagkuha sa RNA.
3. Dili igo nga sample lysis.
Rekomendasyon: Kung mag-homogenize sa tisyu, siguroha nga ang tisyu igo nga homogenized ug ang mga selula sa tisyu igo nga nabahin aron ipasabut ang pagpagawas sa RNA.
4. Ang eluent wala gidugang sa husto.
Rekomendasyon: Kumpirma nga RNase-Free ddH2Ang O gidugang dropwise sa tunga-tunga sa purification column membrane.
5. Ang husto nga gidaghanon sa hingpit nga ethanol wala gidugang sa Buffer RL2 o Buffer RW2.
Rekomendasyon: Sunda ang mga instruksyon, idugang ang saktong gidaghanon sa absolute ethanol sa Buffer RL2 ug Buffer RW2 ug isagol og maayo sa dili pa gamiton ang kit.
6. Ang sample nga dosis sa tissue dili angay.
Rekomendasyon: Paggamit og 10-20 mg nga tissue o (1-5) × 106mga selula kada 500 μl buffer RL1, tungod kay ang sobra nga paggamit sa tissue mahimong moresulta sa pagkunhod sa RNA extraction.
7. Dili husto nga elution volume o dili kompleto nga elution.
Rekomendasyon: Ang gidaghanon sa elution sa kolum sa pagputli mao ang 50-200 μl;kung ang epekto sa elution dili makatagbaw, girekomenda nga i-extend ang oras sa pagbutang sa temperatura sa kwarto pagkahuman idugang ang preheated RNase-Free ddH2O, pananglitan sa 5-10 min.
8.Ang purification column adunay ethanol residue human sa Buffer RW2 nga paghugas.
Rekomendasyon: Kung adunay residue sa ethanol human sa paghugas sa Buffer RW2, walay sulod nga tube centrifugation alang sa 1min, ang oras alang sa walay sulod nga tube centrifugation operation mahimong madugangan ngadto sa 2min, o ang purification column mahimong ibutang sa temperatura sa lawak sulod sa 5 min aron igong makuha ang nahabilin nga ethanol.
Ang giputli nga RNA nadaot
Ang kalidad sa giputli nga RNA adunay kalabotan sa mga hinungdan sama sa pagpreserbar sa sample, kontaminasyon sa RNase, ug pagmaniobra, ug uban pa.
1. Ang mga sample sa tisyu wala gitipigan sa oras.
Rekomendasyon: Kung ang mga sample sa tisyu o mga selula dili gamiton sa tukma sa panahon nga paagi human sa pagkolekta, diha-diha dayon cryopreserve sa -80 °C o liquid nitrogen.Aron makuha ang RNA, gamita ang bag-ong gikuha nga tissue o cell sample kung mahimo.
2. Gibalikbalik nga freeze-thawing sa tissue samples.
Rekomendasyon: Sa pagtipig sa mga sample sa tisyu, labing maayo nga putlon kini ngadto sa gagmay nga mga piraso alang sa pagpreserba, ug kuhaa ang usa sa mga piraso kung gamiton kini aron malikayan ang balik-balik nga freeze-thawing sa sample ug ang pagkadaut sa RNA.
3. Ang RNase gipaila o wala magsul-ob og disposable gloves, mask, ug uban pa atol sa operasyon.
Rekomendasyon: Ang mga eksperimento sa pagkuha sa RNA labing maayo nga gihimo sa separado nga mga lawak sa pagmaniobra sa RNA ug ang lamesa gilimpyohan sa wala pa ang eksperimento.
Pagsul-ob ug disposable nga gwantes ug maskara sa panahon sa eksperimento aron mamenosan ang pagkadaot sa RNA tungod sa pagpaila sa RNase.
4. Reagents kontaminado sa RNase sa panahon sa paggamit.
Rekomendasyon: Ilisan ug bag-ong Animal Total RNA Isolation Kit para sa may kalabutan nga mga eksperimento.
5. Ang centrifuge tubes, mga tip, ug uban pa nga gigamit sa RNA manipulation kay kontaminado sa RNase.
Rekomendasyon: Kumpirma nga ang centrifuge tubes, tip, pipettes, ug uban pa nga gigamit sa RNA extraction kay RNase-Free.
Ang giputli nga nakuha nga RNA makaapekto sa mga eksperimento sa ubos
RNA giputli pinaagi sa pagputli kolum, kon ang asin ions, protina sulod mao ang dako kaayo nga makaapekto sa downstream eksperimento, sama sa: reverse transcription, Northern Blot et al.
1. Ang elutioned RNA adunay salt ion residues.
Rekomendasyon: Kumpirma nga ang saktong gidaghanon sa ethanol gidugang sa Buffer RW2 ug paghimo sa 2 ka paghugas sa kolum sa pagputli sa centrifugal speed nga gipakita alang sa operasyon;kung adunay nahabilin nga asin nga ion, ibilin ang kolum sa pagputli sa Buffer RW2 sulod sa 5 min sa temperatura sa kwarto ug ipahigayon ang centrifugation aron mapadako ang pagtangtang sa kontaminasyon sa asin.
2. Ethanol residue sa elutioned RNA.
Rekomendasyon: Kumpirma nga human sa paghugas sa buffer RW2, himoa ang walay sulod nga tube centrifugation operation sa centrifugation speed nga gipakita alang sa operasyon, dugangi ang oras sa walay sulod nga tube centrifugation operation ngadto sa 2 min kung aduna pa'y ethanol residue, o ibilin kini sa temperatura sa lawak sulod sa 5 min human sa walay sulod nga tube centrifugation aron mapadako ang pagtangtang sa ethanol residue.
