Buccal Swab/FTA Card DNA Isolation Kit Genomic DNA Extraction o Purifiaction Kit gikan sa Buccal Swabs
Deskripsyon sa Kit:
Dali nga limpyohan ang taas nga kalidad nga genomic DNA gikan sa buccal swab/FTA Card sample.
◮Walay kontaminasyon sa RNase:Ang DNA-Only Column nga gihatag sa kit nagpaposible sa pagtangtang sa RNA gikan sa genomic DNA nga walay pagdugang sa RNase sa panahon sa eksperimento, pagpugong sa laboratoryo nga mahugawan sa exogenous RNase.
◮Kusog nga tulin:Ang Foregene Protease adunay mas taas nga kalihokan kaysa parehas nga mga protease, ug dali nga makahilis sa mga sample sa tisyu;ang operasyon yano ra, ug ang operasyon sa pagkuha sa genomic DNA mahimong makompleto sa sulod sa 20-80 minuto.
◮Sayon:Ang centrifugation gihimo sa lawak nga temperatura, ug walay panginahanglan alang sa 4°C ubos-temperatura centrifugation o ethanol precipitation sa DNA.
◮Kaluwasan:Wala’y kinahanglan nga pagkuha sa organikong reagent.
◮Taas nga kalidad:Ang gikuha nga genomic DNA adunay dagkong mga tipik, walay RNA, walay RNase, ug hilabihan ka ubos nga sulod sa ion, nga makatubag sa mga kinahanglanon sa nagkalain-laing mga eksperimento.
◮Micro-elution nga sistema:Mahimo kini nga madugangan ang konsentrasyon sa genomic DNA, nga kombenyente alang sa pag-ila o pag-eksperimento sa ubos.
Deskripsyon
Kini nga kit naghatag usa ka episyente ug paspas nga pamaagi aron makuha ang taas nga konsentrasyon nga genomic DNA gikan sa buccal swabs ug FTA Card (mga spot sa dugo).Gigamit ang among kompanya'Ang talagsaon nga DNA-only silica membrane spin column ug formula, inubanan sa Foregene Protease, taas nga konsentrasyon, taas nga kalidad nga genomic DNA mahimong makuha sa 80 minuto.Ang espesyal nga gidisenyo nga gamay nga kolum sa pagputli nagbugkos sa genomic DNA, ug ang DNA mahimong ma-eluted sa gamay nga kantidad (15μl) nga sistema sa elution aron madugangan ang konsentrasyon sa nakuha nga genomic DNA, nga sayon alang sa pag-ila o eksperimento sa ubos.Ang kit makahimo sa pagproseso sa usa o daghan pa nga mga sample sa usa ka higayon, ug ang proseso sa pagputli wala magkinahanglan og pagkuha sa mga organikong butang sama sa phenol, chloroform, ug pag-usik sa panahon nga isopropanol o ethanol nga ulan, ug ang operasyon yano ug makadaginot sa panahon.
Mga detalye
50 Pagpangandam
Mga sangkap sa kit
| Buffer ST1 |
| Buffer ST2 |
| Linear nga Acrylamide |
| Buffer PW |
| Buffer WB |
| Buffer EB |
| Foregene nga Protease |
| DNA-Only Column |
| Mga instruksyon |
Mga bahin ug bentaha
-Walay kontaminasyon sa RNase: Ang DNA-Only Column nga gihatag sa kit nagpaposible sa pagtangtang sa RNA gikan sa genomic DNA nga walay pagdugang sa RNase sa panahon sa eksperimento, paglikay sa laboratoryo nga mahugawan sa exogenous RNase.
-Paspas nga tulin: Ang Foregene Protease adunay mas taas nga kalihokan kay sa susamang mga protease, dali nga makahilis sa mga sample;simple nga operasyon.
-Sayon: Ang centrifugation gihimo sa temperatura sa lawak, ug walay panginahanglan alang sa 4 °C ubos nga temperatura centrifugation o ethanol precipitation sa DNA.
-Kaluwasan: Walay organic reagent extraction ang gikinahanglan.
-Taas nga kalidad: Ang gikuha nga genomic DNA adunay dagkong mga tipik, walay RNA, walay RNase, ug hilabihan ka ubos nga sulod sa ion, nga makatubag sa mga kinahanglanon sa nagkalain-laing mga eksperimento.
-Micro-elution system: Kini makadugang sa konsentrasyon sa genomic DNA, nga sayon alang sa downstream detection o eksperimento.
Aplikasyon sa kit
Kini angay alang sa pagputli sa genomic DNA gikan sa mosunod nga mga sample: buccal swabs, FTA Card (mga mantsa sa dugo).
Pagtipig ug kinabuhi sa estante
-Kini nga kit mahimong tipigan sulod sa 12 ka bulan ubos sa uga nga kondisyon sa temperatura sa lawak (15-25°C);kung kini kinahanglan nga tipigan sa mas taas nga yugto sa panahon, kini mahimong tipigan sa 2-8 ° C.
Mubo nga sulat: Kung gitipigan sa ubos nga temperatura, ang solusyon dali nga mag-ulan.Sa dili pa gamiton, siguroha nga ibutang ang solusyon sa kit sa temperatura sa lawak sulod sa usa ka yugto sa panahon.Kung gikinahanglan, i-preheat kini sa 37°C water bath sulod sa 10 minutos aron matunaw ang precipitate, ug isagol kini sa dili pa gamiton.
-Ang solusyon sa Foregene Protease adunay usa ka talagsaon nga pormula, nga aktibo kung gitipigan sa temperatura sa kwarto sa dugay nga panahon (3 ka bulan);ang kalihokan ug kalig-on niini mahimong mas maayo kon tipigan sa 4°C, busa girekomendar nga tipigan kini sa 4°C, hinumdomi nga dili kini ibutang sa -20°C.
Ang kolum sa pagputli nabara
Sa kini nga kit, sa genomic DNA extraction operation, ang purification column direkta nga adsorbed sa sample nga enzymatic lysis mixture nga walay centrifugation step, ug ang purification column mahimong ma-block tungod sa dili kompleto nga enzymization ug taas nga viscosity sa sample.
Ang mosunod nga posible nga mga hinungdan mao ang mosunod:
1. Dili kompleto nga enzymatic digestion sa mga sample sa tisyu.
Rekomendasyon: Ang sample nga oras sa pagproseso sa Foregene Protease mahimong tukma nga mapalawig o ang supernatant mahimong makuha human sa centrifugation sa 12,000 rpm (~13,400 × g) sulod sa 5 min.
2. Sobra nga paggamit sa mga sample sa tisyu o dagkong mga tisyu.
Rekomendasyon: Labing maayo nga dili molapas sa 1 Buccal swab sa sample;kung ang sample dako kaayo, dugangi ang dosis sa Buffer ST1, Foregene Protease, buffer ST2 sumala niana.
3. Taas ra kaayo ang sample viscosity.
Rekomendasyon: Ang mga sample mahimong haom nga lasaw sa 10 mM nga Tris-HCl sa dili pa makuha ang genomic DNA.
4. Ang mga tipik sa blood card gisuyop.
Rekomendasyon: Ang lumalabay nga centrifugation time sa step 6 sa blood spot (FTA Card) genomic extraction mahimong tukma nga mapalawig.
Ubos nga ani o walay DNA
Kanunay adunay lainlaing mga hinungdan nga makaapekto sa genomic DNA yield, lakip ang gigikanan sa sample, kondisyon sa pagtipig sa sample, pag-andam sa sample, pagmaniobra, ug uban pa.
Ang genomic DNA dili makuha sa panahon sa pagkuha
Ang posibleng mga hinungdan mao ang mosunod:
1. Ang dili husto nga pagpreserbar sa mga sample o pagtipig sa dugay nga panahon mosangpot sa pagkadaot sa genomic DNA.
Rekomendasyon: Ang mga oral swab kinahanglan nga bag-o lang ma-sample, ug dili maayo nga gamiton ang gipreserbar nga swab para sa genomic DNA extraction operations;Ang mga sample sa dugo kinahanglan nga masiguro nga ang kalidad kuwalipikado ug ang oras sa pagtipig kinahanglan dili kaayo taas.
2. Ang gamay ra kaayo nga paggamit sa tissue mahimong moresulta sa walay pagkuha sa katugbang nga genomic DNA.
Rekomendasyon: Sunda ang buccal swab sampling nga mga instruksyon sa operation guide, ug pagpahid sa daghang mga higayon kutob sa mahimo aron igo nga mga selula ang makatapot sa oral swab para sa genomic DNA extraction;para sa blood spot sample extraction, ang blood spot cutting area mahimong tukma nga madugangan.
3. Ang Foregene Protease dili husto nga gipreserbar, nga miresulta sa pagkunhod sa kalihokan niini o dili aktibo.
Rekomendasyon: Kumpirma ang kondisyon sa pagtipig sa Foregene Protease o pulihan kini og bag-ong Foregene Protease para sa enzymatic reaction.
4. Ang dili husto nga pagpreserbar sa kit o oras sa pagtipig taas kaayo, nga moresulta sa pagkapakyas sa pipila ka mga sangkap sa kit.
Rekomendasyon: Pagpalit ug bag-ong Buccal swab DNA isolation kit para sa may kalabutan nga mga pamaagi.
5. Ang Buffer WB wala magdugang ug hingpit nga ethanol.
Rekomendasyon: Kumpirma nga ang buffer WB nagdugang sa husto nga gidaghanon sa hingpit nga ethanol.
6. Ang eluent dili husto nga gidugang sa silicone film.
Rekomendasyon: Idugang ang 65 °C nga pre-warmed eluent drops sa tunga-tunga sa silicone membrane ug ibilin sa temperatura sa lawak sulod sa 5 min aron madugangan ang elution efficiency.
Ubos nga abot nga genomic DNA gilain
Ang mosunod nga posible nga mga hinungdan mao ang mosunod:
1. Ang dili husto nga pagpreserbar sa mga sample o pagtipig sa dugay nga panahon mosangpot sa pagkadaot sa genomic DNA.
Rekomendasyon: Ang mga oral swab mas maayo nga bag-ong sample, ug ang gipreserbar nga swab kinahanglan dili gamiton alang sa genomic DNA extraction.
2. Kung ang gidaghanon sa sample sa tisyu gamay ra, ang makuha nga genomic DNA nga sulud mas gamay.
Rekomendasyon: Sunda ang oral swab sampling nga mga instruksyon sa operating guide, pagpahid sa makadaghang higayon kutob sa mahimo aron igo nga mga selula ang madugtong sa oral swab para sa genomic DNA extraction.
3. Ang Foregene Protease dili husto nga gipreserbar, nga miresulta sa pagkunhod sa kalihokan niini o dili aktibo.
Rekomendasyon: Kumpirma ang kondisyon sa pagtipig sa Foregene Protease o pulihan kini og bag-ong Foregene Protease para sa enzymatic reaction.
4. Maayo nga mga problema.
Rekomendasyon: Gamita ang Buffer EB para sa elution;kung naggamit ug ddH2O o uban pang eluent, kumpirmahi nga ang pH sa eluate anaa sa taliwala sa 7.0-8.5.
5. Ang eluate dili husto nga gidugang dropwise.
Rekomendasyon: Idugang ang eluent drops sa tunga sa silicone membrane ug biyai sa temperatura sa lawak sulod sa 5 min aron madugangan ang elution efficiency.
6. Gamay ra kaayo ang natipon nga likido sa elution.
Rekomendasyon: Paggamit ug eluent para sa genomic DNA elution sumala sa gikinahanglan sa mga instruksyon, labing menos dili moubos sa 15 μl.
Ubos nga kaputli sa genomic DNA nahimulag
Ang ubos nga kaputli sa genomic DNA mahimong mosangpot sa kapakyasan o dili maayo nga mga resulta sa mga eksperimento sa ubos, sama sa: ang mga enzyme dili maputol, ang PCR dili makakuha sa gene nga tipik sa interes, ug uban pa.
Ang posibleng mga hinungdan mao ang mosunod:
1. Heteroprotein polusyon, RNA polusyon.
Pagtuki: Ang kolum sa pagputli wala gihugasan gamit ang Buffer PW;ang buffer PW wash purification column wala gihugasan gamit ang saktong centrifugal speed.
Rekomendasyon: Siguroha nga walay ulan sa supernatant sa dili pa idugang ang ethanol;siguroha nga hugasan ang kolum sa pagputli sumala sa mga instruksyon, ug kini nga lakang dili mahimong laktawan.
2. Impurity ion polusyon.
Pagtuki: Ang buffer WB wash purification column wala iapil o gihugasan kausa lang, nga miresulta sa nahabilin nga kontaminasyon sa ionic.
Rekomendasyon: Siguruha nga hugasan ang Buffer WB 2 ka beses nga gimando aron makuha ang nahabilin nga mga ion kutob sa mahimo.
3. Kontaminasyon sa RNA enzyme.
Pagtuki: Ang mga langyaw nga RNases gidugang sa buffer;Ang operasyon sa paghugas sa Buffer PW dili sakto, nga miresulta sa mga residu sa RNase, nga nakaapekto sa downstream nga RNA experimental operations, sama sa in vitro transcription.
Rekomendasyon: Ang Foregene series nga nucleic acid isolation kits makatangtang sa RNA nga walay dugang nga RNase, busa ang buccal Swab/FTA Card DNA Isolation Kit dili kinahanglan nga magdugang RNase;siguroha nga sundon ang mga instruksyon para sa buffer PW washing purification column, ug kini nga lakang dili mahimong laktawan.
4. Salin sa ethanol.
Pag-analisa: Ang Buffer WB wala maghimo nga walay sulod nga tube centrifugation human sa paghugas sa kolum sa pagputli.
Rekomendasyon: Buhata ang husto nga walay sulod nga tube centrifugation nga operasyon sumala sa mga instruksyon.
5. Ubang kahugaw nga polusyon.
Pag-analisa: Ang mga na-save nga sample o espesyal nga mga sample dili pretreated.
Rekomendasyon: I-pretreat pag-ayo ang sample ingon sa gisugo.
