Manufacturer sa China alang sa 2 × Concentrated Premix alang sa Dili Purified Sample Real-Time Quantitative PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U
Ang organisasyon nagpadayon sa konsepto sa pamaagi "scientific management, high quality and efficiency primacy, purchaser supreme for China Manufacturer for 2× Concentrated Premix for Unpurified Sample Real-Time Quantitative PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, Ang among negosyo dedikado sa paghatag sa mga kustomer og mahinungdanon ug luwas nga top quality nga mga produkto sa agresibo nga presyo, nga makapahimuot sa matag usa ug sa matag kustomer.
Ang organisasyon nagpadayon sa konsepto sa pamaagi nga "pagdumala sa siyensya, taas nga kalidad ug pagkaepisyente nga panguna, labing kataas nga tigpamalit alang saChina Taq DNA Polymerase ug Qpcr, Ang among kompanya adunay daghang kusog ug adunay usa ka makanunayon ug hingpit nga sistema sa network sa pagpamaligya.Nanghinaut kami nga makahimo kami og maayo nga relasyon sa negosyo sa tanan nga mga kustomer gikan sa balay ug sa gawas sa nasud pinasukad sa mga kaayohan sa usag usa.
Tinuod nga Panahon nga mga prinsipyo sa disenyo sa primer sa PCR
Ipasa ang Primer ug Reverse Primer
Para sa Real Time PCR, ang primerong disenyo importante kaayo.Ang mga primer may kalabotan sa pagkasigurado ug kaepektibo sa PCR amplification, ug mahimong gidisenyo nga may kalabotan sa mosunod nga mga prinsipyo:
- Panguna nga gitas-on: 18-30bp.
- GC sulod: 40-60%.
- Tm nga bili: Primer design software, sama sa Primer 5, makahatag sa Tm value sa primer.Ang mga kantidad sa Tm sa upstream ug downstream primers kinahanglan nga duol sa mahimo.Ang pormula sa pagkalkula sa Tm mahimo usab nga gamiton: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Sa paghimo sa PCR, ang usa ka temperatura nga ubos sa primer Tm nga kantidad nga 5 °C kasagarang gipili isip annealing temperature (ang katugbang nga pagtaas sa annealing temperature mahimong makadugang sa specificity sa PCR reaction).
- Mga Primer ug mga produkto sa PCR:
- Disenyo primer PCR amplification produkto gitas-on mao ang labing maayo nga 100-150bp.
- Ang mga primer sa disenyo sa sekondaryang bahin sa estruktura sa template kinahanglang likayan kutob sa mahimo.
- Likayi ang pagporma sa 2 o labaw pa nga komplementaryong base tali sa 3′ nga tumoy sa upstream ug downstream primers.
- Primer 3′ terminal base dili mahimong anaa sa 3 ka dugang nga sunod-sunod nga G o C.
- Ang mga primer mismo dili adunay mga komplementaryong istruktura, kung dili usa ka istruktura sa hairpin ang maporma, nga makaapekto sa PCR amplification.
- Ang ATCG kinahanglang iapod-apod nga parehas kutob sa mahimo sa primer sequence, ug ang 3′ terminal base kinahanglang likayan isip T.
Apendise1:Cell DirektaRT-qPCR Kit nga sangkapt suplemento nga pakete
1.Cell Lysis Solution
Solusyon sa Cell Lysis | |||
Mga sangkap sa kit (24-well lysis system / atabay) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
BahinAko | Buffer CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Buffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
BahinII | DNA eraser | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Mix | |
Mga sangkap sa kit (20 μl nga sistema sa reaksyon) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5 × Direktang RT Mix | 800 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 ml × 2 |
Pagsagol sa qPCR | ||
Mga sangkap sa kit (20 μl nga sistema sa reaksyon) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2 × Direkta nga qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1.7 ml × 6 |
20× ROX Reference Dye | 40 μl | 200 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 ml | 10 ml |
Ang organisasyon nagpadayon sa konsepto sa pamaagi "scientific management, high quality and efficiency primacy, purchaser supreme for China Manufacturer for 2× Concentrated Premix for Unpurified Sample Real-Time Quantitative PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, Ang among negosyo dedikado sa paghatag sa mga kustomer og mahinungdanon ug luwas nga top quality nga mga produkto sa agresibo nga presyo, nga makapahimuot sa matag usa ug sa matag kustomer.
China Manufacturer alang saChina Taq DNA Polymerase ug Qpcr, Ang among kompanya adunay daghang kusog ug adunay usa ka makanunayon ug hingpit nga sistema sa network sa pagpamaligya.Nanghinaut kami nga makahimo kami og maayo nga relasyon sa negosyo sa tanan nga mga kustomer gikan sa balay ug sa gawas sa nasud pinasukad sa mga kaayohan sa usag usa.
Tinuod nga Panahon nga mga prinsipyo sa disenyo sa primer sa PCR
Ipasa ang Primer ug Reverse Primer
Para sa Real Time PCR, ang primerong disenyo importante kaayo.Ang mga primer may kalabotan sa pagkasigurado ug kaepektibo sa PCR amplification, ug mahimong gidisenyo nga may kalabotan sa mosunod nga mga prinsipyo:
- Panguna nga gitas-on: 18-30bp.
- GC sulod: 40-60%.
- Tm nga bili: Primer design software, sama sa Primer 5, makahatag sa Tm value sa primer.Ang mga kantidad sa Tm sa upstream ug downstream primers kinahanglan nga duol sa mahimo.Ang pormula sa pagkalkula sa Tm mahimo usab nga gamiton: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Sa paghimo sa PCR, ang usa ka temperatura nga ubos sa primer Tm nga kantidad nga 5 °C kasagarang gipili isip annealing temperature (ang katugbang nga pagtaas sa annealing temperature mahimong makadugang sa specificity sa PCR reaction).
- Mga Primer ug mga produkto sa PCR:
- Disenyo primer PCR amplification produkto gitas-on mao ang labing maayo nga 100-150bp.
- Ang mga primer sa disenyo sa sekondaryang bahin sa estruktura sa template kinahanglang likayan kutob sa mahimo.
- Likayi ang pagporma sa 2 o labaw pa nga komplementaryong base tali sa 3′ nga tumoy sa upstream ug downstream primers.
- Primer 3′ terminal base dili mahimong anaa sa 3 ka dugang nga sunod-sunod nga G o C.
- Ang mga primer mismo dili adunay mga komplementaryong istruktura, kung dili usa ka istruktura sa hairpin ang maporma, nga makaapekto sa PCR amplification.
- Ang ATCG kinahanglang iapod-apod nga parehas kutob sa mahimo sa primer sequence, ug ang 3′ terminal base kinahanglang likayan isip T.
Apendise1:Cell DirektaRT-qPCR Kit nga sangkapt suplemento nga pakete
1.Cell Lysis Solution
Solusyon sa Cell Lysis | |||
Mga sangkap sa kit (24-well lysis system / atabay) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
BahinAko | Buffer CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Buffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
BahinII | DNA eraser | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Mix | |
Mga sangkap sa kit (20 μl nga sistema sa reaksyon) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5 × Direktang RT Mix | 800 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 ml × 2 |
Pagsagol sa qPCR | ||
Mga sangkap sa kit (20 μl nga sistema sa reaksyon) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2 × Direkta nga qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1.7 ml × 6 |
20× ROX Reference Dye | 40 μl | 200 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 ml | 10 ml |
Mga Manwal sa Instruksyon: