Direkta nga RT-qPCR Kit II
Deskripsyon sa Kit:
◮Direkta nga RT-qPCR Kit, gamit ang Foreasy Reverse Transcriptase ug Foreasy HS Taq DNA Polymerase nga naugmad ni Foregene, nga adunay talagsaon nga reaksyon buffer, naghimo niini nga kit nga adunay lig-on nga pagsukol ug pagkaangay, ug kini direkta nga makasulay sa reaksyon gamit ang Foregene Lysis system isip template.Kini nga kit mahimong magamit alang sa COVID-19 nucleic acid detection kit ug uban pang pathogenic bacteria nga nucleic acid detection kit development.
Deskripsyon
Ang Direct RT-qPCR Kit naghatag og gilain nga giputos nga RT-qPCR buffer, taas nga episyente nga Foreasy HS Taq DNA Polymeraseug Foreasy Reverse Transcriptase (MMLV),naghimo niini nga sayon alang sa paghimo sa back-end kits ug sistema adjustment, sulod sa yano nga verification.
Direkta nga RT-qPCR Kit, gamit ang Foreasy Reverse Transcriptase ug Foreasy HS Taq DNA Polymerase nga naugmad ni Foregene, nga adunay talagsaon nga reaksyon buffer, naghimo niini nga kit nga adunay lig-on nga pagsukol ug pagkaangay, ug kini direkta nga makasulay sa reaksyon gamit ang Foregene Lysis system isip template.Kini nga kit mahimong magamit alang sa COVID-19 nucleic acid detection kit ug uban pang pathogenic bacteria nga nucleic acid detection kit development.
Kini nga kit mahimong direkta nga bahin sa produkto sa IVD, dali ug paspas nga gigamit.Nagkinahanglan lang kini og dali nga pag-verify, nga wala’y pag-uswag pag-usab.
Mga detalye
500T, 50,000T
Mga sangkap sa kit
| Mga sulod sa kit (20 μL nga sistema sa reaksyon) | IM-05111-02 | IM-05112-02 |
| 500 T | 50,000 T | |
| Foreasy Reverse Transcriptase (200 U/μL) | 50 μL×1 | 1 mL×5 |
| Foreasy HS Taq DNA Polymerase (5 U/μL) | 100 μL×1 | 1 mL×10 |
| 2× Direktang RT-qPCRBuffer | 1 mL × 5 | 500 mL × 1 |
| Instruksyon | 1 | 1 |
Mga Lakang sa Pag-opera
A: Pag-andam sa template ug reagent
1. Pag-andam ug giandam nga RNA template (Girekomendar nga gamiton ang Foregene Total RNA Isolation Kit series kit aron makuha ug putli ang RNA template) o sample cracking product (Girekomenda nga gamiton ang Foregene Lysis system), piho nga primers(10 μM) ug uban pang may kalabutan nga mga gamit, instrumento.
2. Ibutang ang 2× Direct RT-qPCR Buffer, RNase-Free ddH2O ug 20× ROX Reference Dye (kon gikinahanglan) sa kahon nga adunay yelo, nga natural nga matunaw kini, ug hinayhinay nga isagol.
B: Pag-andam sa RT-qPCR system
Kuhaa ang katunga sa gidaghanon sa reaksyon buffer sa reaksyon nga sistema (pananglitan, kung ang gidaghanon sa sistema mao ang 20 μL, kini kinahanglan nga makakuha og 10 μL 2 × Direct RT-qPCR Buffer). Kaykatumbas nga kantidad sa enzyme, among gisugyot kanaM-MLV:10-30 U/20 μL nga sistema sa reaksyon,TaqDNA polymerase:1-2 U/20 μL nga sistema sa reaksyonkini ang among sugyot, kinahanglan nimo nga sulayan ug i-adjust kini), idugang ang template sa RNA, piho nga mga primer ug probe, ug idugang ang RNase-Free ddH2O hangtod sa 20 μL.Ang espesipikong pag-andam sa RT-qPCR reaction system mahimong i-refer sa mosunod nga table 1.
Talaan 1: Pag-andam sa RT-qPCR system
| Component | Tomo | Katapusan nga konsentrasyon |
| 2× Direktang RT-qPCR Buffer | 10 μL | 1 × |
| Foreasy Reverse Transcriptase(MMLV) | 10-30 U | |
| Foreasy HS Taq DNA Polymerase | 1-2 U | |
| Ipasa nga Primer(10 μM) | 0.8 μl | 50-900nM |
| Baliktad nga Primer(10 μM) | 0.8 μl | 50-900nM |
| Probe(4 μM) | 1 μL | 200nM |
| Template(RNA o Lysate) | X μL | |
| 20× ROX Reference Dye | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| Kinatibuk-ang Tomo | 20 μL |
Mubo nga sulat: Ang Forward Primer ug Reverse Primer maoy mga espesipikong primer sa target nga gene.Ang sistema sa qPCR mahimong ipasibo sumala sa praktikal nga eksperimento ug mga modelo sa PCR.Girekomenda namon ang 400nM alang sa katapusang konsentrasyon sa kadaghanan sa mga primer.I-adjust ang gidaghanon sa mga espisipikong primers ug probes sumala sa giandam nga konsentrasyon ug ang girekomendar nga kataposang konsentrasyon, palihog.
1*: Pilia ang angay nga katapusang konsentrasyon sa ROX Reference Dye sumala sa lain-laing quantitative PCR instruments.Ang labing maayo nga ROX Reference Dye nga konsentrasyon sa kasagaran nga quantitative nga mga instrumento sa PCR gipakita sa mosunod nga lamesa:
| Quantitative nga mga instrumento sa PCR | Katapusan nga konsentrasyon sa ROX Reference Dye |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/Unang Lakang,ug uban pa. | 1× (pananglitan, idugang ang 1μl 20×ROX Reference Dye sa 20 μL reaction system) |
| ABI 7500, 7500 Fast, Stratagene Mx3000P, Mx3005P ug Mx4000, etc. | 0.5× (pananglitan, idugang ang 0.5μl 20×ROX Reference Dye sa 20 μL reaction system) |
| Roche PCR instrumento, Bio-Rad PCR instrumento, Eppendorf quantitative PCR instrument, etc. | Kung walay ROX Reference Dye |
Pagtipig ug kinabuhi sa estante
Ang kit kinahanglan nga tipigan sa -20 ± 5 ℃.Kini kinahanglan nga gitipigan dayon sa -20 ℃ thermostatic refrigerator.Ang balido nga panahon mao ang 2 ka tuig kung kini tipigan sa angay nga kondisyon.
